高迁移率族蛋白1在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用及丙酮酸乙酯的疗效.pdfVIP

中文摘要 再灌注治疗虽然使缺血部位心肌血供得到恢复，但也可导致再灌注损伤。心 肌缺血．再灌注损伤(IRJ)的存在限制了再灌注治疗效果。炎症反应、氧化应激、 钙超载均为心肌IRI的重要机制，但其始发因素及信弓转导机制尚未彻底阐明。 为此，深入探讨心肌IRI的分子调控机制及有效防治对策必将具有重要的临床及 理论价值。本研究利用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，着重探讨心肌缺血．再灌 注后高迁移率族蛋白1(HMGBl)的表达及其与心肌IRI的关系，同时观察丙酮 酸乙酯干预对心肌IRI的作用及分子机制，研究主要由4部分组成：①心肌缺 血．再灌注后高迁移率族蛋白l的表达及其作用，②丙酮酸乙酯干预心肌缺血． 再灌注损伤的剂量及时机，③高迁移率族蛋白1介导炎性缺血．再灌注损伤的机 制及丙酮酸乙酯的作用，④丙酮酸乙酯对心肌缺血．再灌注后氧自由基及线粒体 的影响。 一、 心肌缺血再灌注后高迁移率族蛋白1的表达及其作用 box 目的探讨高迁移率族蛋白l(highmobilitygroup1，HMGBl)在心肌缺血一再 灌注后的时空表达特点；观察外源性HMGBl对心肌缺血再灌注损伤的影响及其 可能机制。 方法第1部分：清洁级健康雄性SD大鼠分为5组，每组6只，分别于心肌缺 血前、缺血30分钟、再灌注30分钟、再灌注24小时、再灌注48小时处死大鼠， 留取标本检测HMGBl的表达。第1I部分：清洁级健康雄性SD大鼠分为4组， u u la la g／kg组(HMGBl·lg)，HMGBl-10g／kg组(HMGBl—10g)，HMGBl-100 u la g／kg组(HMGBl—100g)，后3组在缺血再灌注后注射相应剂量rhHMGBl。 采用有创血流动力学检测大鼠左心功能变化，TTc染色计算心肌梗死面积，免 PCR、Western 疫组化、Real—time TLR．4的表达。 2 结果第1部分：在正常心肌组织中，HMGBl蛋白定位于心肌细胞核内；心肌 缺血再灌注后，HMGBl阳性表达的细胞不仅位于心肌细胞核内，而且大量表达 于梗死区域内的炎性细胞；HMGBl在大鼠心肌缺血30分钟后显著增高，并持 u 续至再灌注48小时。第1I部分：与Control组相比，HMGBl．1 g组、HMGBl．10 pg组心肌梗死面积、±dp／dt p 但与Control组相比，HMGBl—100 g组心肌梗死面积显著增大(56．4±5．1％VS． VS． max显著恶化(2199士185 44．6±3．7％，P0．05)，±dp／dt mmHg／s VS．1979a：190 2890a：217mmHg／s；1536士122mmHg／s u TNF．Q及IL．6水平显著增高，与Control组相比，HMGBl—100 g组RAGE、 TLR．2、．TLR．4水平明显增高，其中以RAGE升高幅度最为明显。 结论心肌缺血再灌注后心肌及炎症细胞胞核浆HMGBl表达显著增高，外源性 体介导加重炎症反应及心肌损伤。 二、 丙酮酸乙酯干预心肌缺血再灌注损伤的剂量及时机 目的观察不同剂量丙酮酸乙酯(Ethylpyruvate，E