腹腔注射PAAF与PPAF诱导大鼠急性肺损伤的对比研究.pdfVIP

国际胃肠疾病论坛(重庆)簧第三届内分泌外科学术研讨会·大会交流论文 1．1 实验动物和主要试剂 公司)。 1．2 大鼠急性坏死性胰腺炎模型的建立和PAAF收集 参照文献【2】建立急性坏死性胰腺炎模型和收集P儿虹。SD大鼠60只，3％戊巴比妥钠腹腔注射麻 总管，于胆胰管与十二指肠汇合部，以皮下留置套管针从十二指肠前壁穿刺入胆胰管，以低恒压逆行推 胰腺在短时间内出现肉眼可见的水肿出血、局部坏死，模型建立。ANP大鼠模型建立后7h，无菌状态 下开腹收集眦，每只ANP大鼠产生5--一9ml 取上清液，．80℃冰箱保存备用。 1．3 消化道穿道穿孔性腹膜炎模型的建立和PPAF收集 3％戊巴 参照文献【3】建立消化道穿道穿孔性腹膜炎模型和收集PPAF。SD大鼠60只，雌雄不限， 比妥钠腹腔注射麻醉(30mg／kg)，严格无菌操作，进腹后横断十二指肠球部无血管区l／2周径，并将胃 窦部下拉悬吊于中腹部腹壁。以0号丝线结扎各出血点，无活动性出血后分两层关腹。于造模后7h开 腹共收集约320ml腹水，4C。2500r／rain离心15rain，取上清液于．80℃冰箱保存备用。 1．4 实验动物分组处理 死，各时间点8只。 1．5 检测指标 (1)肺组织病理损害处死动物时开胸统一留取左肺下叶部分肺组织，lO％福尔马林固定，HE染色， 统一由病理科医师光镜下观察肺组织病理损害情况。按文献[4】，从水肿、炎性细胞浸润和灶性 出血三方面进行肺组织病理损害评分。 织，采用研磨法制备单细胞悬液，行肺组织细胞PI单染流式细胞仪检测细胞凋亡率(试剂购自美 国BD公司)。 (3)肺组织髓过氧化物酶(MPO)统一留取左肺上叶部分组织行MPO测定。 (4)肺组织湿／干比将取材并称重后的右肺置于烤箱内，160℃烘烤48h再称重，然后计算肺组织 湿／干质量比(W／O)，计算公式为：(湿质量一千质量)／干质量)。 1．6 统计学处理 以SPSSll．5医学统计软件进行数据分析，计量资料以冤蛔表示，两组均数的比较，采用成组t检 验；多组均数的比较采用单因素方差分析，P0．05认为差异有统计学意义。 155 目％目Ⅸ《自≈￡(Ⅲ自)Ⅱ镕=目^H**#}}**☆★会女mm女 2．结果 2．1肺病理损害评分评分和湿干比 腹腔注射生理盐水太鼠的肺组织光镜下表现为肺泡大小相等，肺泡腔内无渗出，肺泡间隔无水肿增 厚(图1、2)。 PPAF 图5 PPAF7h，肺组织(HEx200)图6 12h．肺组织(HEx200) 国际胃肠疾病论坛(重庆)暨第三届内分泌外科学术研讨会·大会交流论文 表1肺组织病理损害评分和湿干比 肺组织病理损害评分(i姆) 湿干比(i蛔) 组别 n 7h 12h 7h 12h #V8NS组同时间点，P=o．000；§VS同组7h，P0．01． 2．3肺组织细胞凋亡率和肺组织MPO，见表2。 表2肺组织MPO水平和肺细胞凋亡率 #ⅦNS组同时间点，P=o．000．§vs同组7h，P0．05． ru r” l-●I‘-㈧㈥№…㈧-…10 It．一 ●●- 110●-●H● 一■- ●．●I-．●■L● ●●．IIO-●●，●．●t●●．●● t■憾● _．■ 图7NS组7ll细胞凋亡率