JNKAP-1通路在柚皮素抑制RSV感染引起气道黏液高分泌中的作用.pdfVIP

182· ．呼吸疾病研究． JNK／AP．1通路在柚皮素抑制RSV感染 引起气道黏液高分泌中的作用 孟珊珊 吴艳玲胡晓光 张海邻 李昌崇 【摘要】 目的探讨JNK／AP一1通路在柚皮素抑制呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起气道黏液高 分泌中的作用。方法 通过RSVA2株感染人肺腺癌上皮(A549)细胞，细胞维持液培养为细胞对照 组，细胞中加入不同MOI的RSV吸附2h为RSV感染组(R1、R2、R3组M01分别为0．5、1．0、5．0)， 30 在RSV感染前加入柚皮素(Nar)预处理1h为Nar干预组(N1组为Nartxmol／L+RSV、N2组为Nar I山mo]／L和 100斗mol／L+RSV)，不同浓度的Nar培养液培养为Nar组(N3、N4组的Nar分别为30 100 txmol／L的JNK Ilmol／L)，含0．1％的二甲基亚砜的细胞培养液培养细胞为DMSO组(D组)，用10 h后加用MOI=i．0的RSV感染2h，感染后加入细胞维持液为 通路阻断剂SP600125预处理l SP600125干预组(s组)。采用实时荧光定量PCR、ELISA检测各组细胞黏蛋白(MUC)5AC的表达情 mRNA及 况；采用Westernblot检测JNK、P—JNK、AP一1蛋白的表达水平。结果RSV感染组MUC5AC 蛋白表达水平均高于细胞对照组(P0．05)，且随病毒感染量的增加，MUC5AC基因及蛋白表达量 也逐渐增加。Nar干预组与RSV感染组相比，MUC5ACmRNA和蛋白水平降低，随Nar浓度增加，降 低更为明显，呈剂量相关性(P0．05)。R2组p-JNK、AP一1蛋白相对表达量分别为3．31±0．34、 1．94±0．05，显著高于细胞对照组(均为1．00±0．00)(P0．05)。N2组、s组p-JNK蛋白相对表达量 为2．10±0．27、1．97±0．16，AP一1蛋白表达量为1．404-0．03、1．364-0．05，均较R2组下降(P0．05)。 N2组和s组MUC5AC蛋白表达量为(43．17±1．06)斗g／L、(44．02±0．99)斗∥L，差异无统计学意义 (P0．05)，但两组均低于R2组(48．19±0．47)¨g／L(P0．05)。结论RSVA2株感染A549细胞 会导致黏蛋白MUC5AC基因转录和蛋白表达增加，JNK／AP一1通路在柚皮素抑制RSV感染引起的气 道黏液高分泌中起调控作用。 【关键词】 呼吸道合胞病毒；黏液；黏蛋白5AC；柚皮素 blockRSV-inducedmucous inA549cellvia JNK／AP-1 Naringeninmay hypersecretion signaling Shanshan，Wu Hailin，LiChangchong．Departmentof pathwayMeng Yanling，HuXiaoguang，Zhang Wenzhou Children’S to Medical Diseases，YuyingHospitalAffiliated University，Wenzhou325027， Respiratory China com Hailin，EmaiZ：zhlwz97@hotmaiL Correspondingauthor：Zhang