指甲中氯氮平的LC-MS%2fMS的分析与研究.pdfVIP

or3 VorenstcandPractice 一29一 Sympos|um Theory 指甲中氯氮平的LC-MS／MS分析研究 陈航h2向平1孙其然1沈敏P (1．司法部司法鉴定科学技术研究所上海市法医学重点实验室，上海200063； 2．复旦大学基础医学院法医学系，上海200032) 【摘要】目的建立指甲中氯氮平的定性定量方法，为指甲中毒药物分析方法做出探索和了解。 方法指甲冷冻磨碎、 使用流动相超声、LC-MS／MS测定。 结果在10名精神病患者指甲中检出了氯氮平和它的一种主要代谢物—呻●．去甲 结论本次建立的方法准确度高，线性好，精密度高，适合法庭毒物学分析，服用的氯氮乎能在指甲中找到其药物原 型及代谢物。 【关键词】 指甲分析；氯氦平；前处理：液相色谱．质谱串联联用 指甲作为物证检材检测滥用药物始于1984年uJ，直到最近由于无损取样、样品稳定性高、信息的检测时 窗长和不易被替换篡改等在法医毒物学分析中非常重要的性质闭而正逐渐引起证据科学领域的注意脚。本文 尝试于指甲中滥用药物检测开创较为系统研究，也为国内首份指甲中滥用药物含量检测报道。精神药品氯氮 平长期作为治疗精神分裂症等精神疾病首选药物，同时也由其严重毒副作用和易获取等因素使得其常成为涉 案滥用药物。于此背景需求下，本研究试图以建立氯氮平及其主要代谢物为目标物的液相色谱质谱联用技术 方法作为指甲中滥用药物检测系统研究之开篇，同时，使用氘代氯氮平作为系统内标以考察仪器分析方法与 提高方法评价结果。 1材料和方法 1．1化学试剂 氯氮平(Img／mL)及氘代氯氮平(1mg／mL)购自Cerilliant(Round 级甲醇及乙腈购自Sigma Medi． Denmark)制备。其他实验过程中可能用到的试剂为分析纯等级并购自ChemicalReagentGroup，Shanghai cines Co．，Ltd(Shanghai，China)。 1．2溶液配制 ng／mg、2 取冷冻球磨后空白指甲，每份5mg，分别添加适量氯氮平储备液制成O．5 ng／mg、8ng／mg、16 ng／mg、30ng／mg、40ng／mg、50ng／mg的标准曲线样品(7个浓度点X3份)。取冷冻球磨后的空白指甲，每 份5mg，分别添加适量氯氮平储备液制成2ng／mg、16 ng／mg、40nedmg质控样品(3个浓度点X3份)。精密 董取809LI)4一氯氮平(100ug／mlmethan01)，置10mL容量瓶，加甲醇配制成800ng／mLD4．氯氮平内标。称 取1．839乙酸铵、1．559 酸液相缓冲液。取100mL缓冲液与100mL乙腈混匀，配制成V缓存液／v乙腈=1／1的流动相。 1．3样本收集 1．3。l空白指甲 空白指甲收集自本实验室无氯氮平使用史志愿人员日常指甲修剪碎片，其毛发被同期分析以确保被采集 人员无氯氮平接触。所有的指甲碎片被甲醇洗涤过指甲刀修剪并收集于洁净的EP管，并避光储存于4℃冰箱。 ‘通讯作者 一30一 司法鉴定理论与实翻}研讨。分论文套 1．3．2阳性指甲 阳性指甲样品来源于某安康医院10名氯氮平服药史大于9个月的精神疾病患者。所有接受采集的患者均 在清醒状态下口头同意对其进行指甲修剪，修剪过程为由洁净钢制指甲钳贴手指甲床边缘铰下伸出甲床外缘 的甲片，记录总重、用药史，各自置入洁净EP管_4℃避光保存，同时采集同一个体毛发一并保存。我们保 证全采集过程对患者无损。 1．4样品前处理优化 称取75rag编号为2、6和7的三份阳性指甲，SDS清洗3次，去离子水荡涤，丙酮冲洗后随机分为5组， 每组3份，每份5rag。不同组分别采用表l所列提取方法提取。