人血小板生物特异性萃取结合HPLC%2fESI-MS%2fMS筛选三七中抗血小板聚集活性成分.pdfVIP

曲m肌d胁fcr(中草药)．2005．28(7)：s63—566 wANGL C xD SIud㈣theRPLC (11)：687_688． f1351 X，wANGz，cENc Y and evaluatIon crude u^NG app¨。d 6”胪叩”nb q“dl‘y of印删唧L dn。铲 [137] z，GONGF，YuRQ，“df．cheTrIomddcs torcsearche80nchi嗍t训itiondm列icine[J]．尸J。g删 fJi^c旭矾ms‘n(化学学于}{)．2006．64(6)：55】{55． cuo s {】舭nnⅢaIⅢn jn 吼呷(化学进展)．1998．“(2)：2。8之12． Q，zHANG nr。plmedmEplmedlf [136] Q andauthentk“e umbrewc帆umRP—HPL．c by by Ep{me执m 板聚集活性成分 王静，李绍平’，王一涛(澳门大学中华医药研究院，澳门) 三七总皂苷(云南玉溪万方天然药物有限公司)；人 三七为五加科多年生草本植物Pan“noto咖一 seng(Burk．)F．H．chen的干燥根，具有散淤止血、 消肿定痛之功效[1】。近年来多用于治疗冠心病、心 Bu船red 绞痛等心脑血管系统疾病∞】，但是在心脑血管系 苷(A)、鸟苷(G)、花生四烯酸(从)、二磷酸腺苷 统痍癀治疗中发挥抗血小板聚集作用的成分还不清 楚。现代药理研究表明，药物要产生效应一般首先 要与细胞膜上的受体或通道结合。一些研究已经利 醇(德国Merck公司。色谱纯)，MiⅡi—Q水，其它试剂 用活细胞萃取结合HPLc”’o或cc”1的方法预测 中药中的活性成分。 均为分析纯。 本实验采用人血小板生物特异性萃取结合高效 新西兰种白兔，6，(1_8～2．5)kg，由中山大学 实验动物中心提供，清洁级，实验动物许可证：scxK 液相色谱-质谱(HPLc／EsI—Ms／Ms)技术筛选三七 中抗血小板聚集的活性成分，发现有5个成分能与 (粤)2005一Ao“。 血小板特异性结合。对其中的2个核苷成分进行了 2实验方法 体外抗血小板聚集实验。并对三七中鸟苷和腺苷进 2．1 筛选抗血小板聚集成分 行了定量测定。 2．1．1筛选样品的制备取PBs粉末9．6g，溶于 1仪器与材料 lL纯水中，用磷酸分别调pH值为7．4和3．9。100 r Ooo 1．1仪器 g三七超细粉加10倍量水超声提取30min，3 ·min“离心15min，上清滚加3倍量乙醇冷藏静置 Agilen“100液相色谱仪，配有二极管阵列 沉淀，沉淀后的上清液回收乙醇，收集的水液冻干。 (DAD)检测器和A舀lent化学工作站；Agilen“100 取冻干的粉末2．5 L∥MsD