基质金属蛋白酶及组织基质金属蛋白酶抑制剂在大肠癌中的表达的研究.pdf

中文摘要 基质金属蛋白酶及组织金属蛋白酶抑制剂 在大肠癌中的表达研究 摘 要 目的：大肠癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病 率有逐年上升趋势。大肠癌患者虽可经过手术，化疗、放 疗及其它综合治疗有一定的疗效，但资料显示，约有30％ 的患者仍在五年内死于复发和远处转移。因此，研究和探 讨大肠癌的侵袭和转移机制成为目前研究的热点。众多研 究发现，肿瘤的浸润和转移是一个多步骤的复杂过程，其 中肿瘤周围基膜的降解是肿瘤细胞向邻近结缔组织浸润进 而向远处转移过程中最基本的一步。基膜完整性的丧失与 局部扩散，远处转移和不良预后密切相关。而由肿瘤组织 分泌的基质金属蛋白酶(Matrix MMPs) metailoproteinases 能够引起细胞外基质和基膜的降解，从而促进肿瘤的侵袭 和转移。同时，其抑制因子可以抑制基质金属蛋白酶的活 性，从而保持基膜的完整性，阻止肿瘤的侵袭和转移。目 前，国内对基质金属蛋白酶及其抑制剂在大肠癌中的生物 学作用研究较少。因此，本课题利用RT-PCR方法，在基 的表达特点及与大肠癌的临床病理之间相互关系，以探讨 三者在大肠癌的侵袭和转移机制中的作用，并可为基质金 属蛋白酶抑制剂在大肠癌治疗中的应用提供理论依据。 方法：随机选取2001年8月至2001年12月在河北医 科大学第四医院行外科手术治疗的30例大肠癌患者的肿 中文摘要 瘤组织标本，并以距肿瘤边缘10cm的正常粘膜作为对照， 标本均于离体半小时内采集，液氮速冻，后转至．80冰箱贮 存待用。所有标本均经病理证实。以异硫氰酸胍．酚．氯仿 (acid 组织的总RNA，应用逆转录．聚合酶链反应(RT．PCR)技 术扩增MMP．2、TIMP．2和MTl．MMP基因，同时扩增13 ．actin作为内参照。扩增产物电泳后经凝胶成像分析系统照 相、分析，以电泳条带上各产物的面积与灰度值的乘积作 为积分光密度值，并将IVlMP．2、TIMP．2、MTl．MMP与 B．actin的积分光密度值的比值作为大肠癌中各产物的表 达水平的参数．运用x2检验，t检验，方差分析，相关分析， 多元逐步回归，对数据进行分析和统计。 结果：1．30例大肠癌组织中的MMP一2mRNA表达均 阳性，表达率为100％。在正常粘膜有22例(73．33％)表 达阳性，两者之间表达率具有极显著性差异(P0．01)。 MMP．2 mRNA的表达水平在肿瘤组织及正常组织分别为 0．3472±0．0429、O．1850±0．0333，两者之间具有极显著性 差异(po．01)。在大肠癌组织中，MMP-2mRNA的表达水 平在淋巴结转移组显著高于无转移组(PO．05)；并且其表 达水平在DukesB、C、D期逐步升高，在D期与A、B、 C期之间存在显著性差异(P0．05)；多元逐步回归分析显 示， MMP一2mRNA的表达水平与Dukes分期呈正相关 (P0．01)；大肠癌组织中MMP．2mRNA的表达水平与年 龄、性别及肿瘤大小、分化程度、部位等因素无关(P 0．05)。 2．30例大肠癌组织中有29例(96．79％)扩增出 中文摘要 两者之间表达率无显著差异(P0．05)。在肿瘤组织及正常组 0．6325±0．0532，两者之间无显著差异(P0．05)。在大肠癌 组织中，TIMP．2mRNA的表达水平随Dukes分期进展而 升高，而只有在D期的表达水平与A、B、C期存在显著 多元逐步回归分析显示，TIMP．2mRNA 性差异(P0．05)； 的表达水平与Dukes分期呈正相关(p0．01)。在大肠癌组 织中，TIMP．2mRNA的表达水平与年龄、性别、肿瘤部位、 大小、分化程度及淋巴结转移无关(P0．05)。 3．在30例肿瘤及正常组织中均有MTl．1、n伸mRNA 的表达。在肿瘤组织及正常组织中MTI．MMPmRNA的表 达水平分别为0．7830±0．0548、0．5403±0．053l，两者之间 有极显著性差异(P0．01