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中华中医药学会四大怀药与地道药材研究论坛暨中药炮制分会第二届第五次学术会议与第三届会员代表大会论文集 采用两种方法加工的北沙参粗多糖的提取及对阴虚型 小鼠的免疫调节作用比较 1 2 1 3 3 刘 波 ,刘咏梅 ,王金凤 ,冯永堂 ,苗乃法 (1. 山东中医药高等专科学校，山东 莱阳 265200； 2. 中国中医科学院广安门医院，北京 100053； 3.潍坊医学院免疫教研室，山东 潍坊 261042) 摘要 目的:比较自采用两种方法加工的北沙参中分别提取的北沙参粗多糖(Polysaccharide of Glehnia littoralis Fr.Schmidt ex Miq.，GLP)对甲亢型阴虚小鼠的免疫调节作用。方法:分别提取 去皮加工北沙参粗多糖（GLP1 ）和未去皮加工北沙参粗多糖（GLP2 ），制备阴虚小鼠模型，观 察小鼠体重变化，检测其脾脏抗体生成细胞(AFC)、迟发型超敏反应(DTH)和腹腔巨噬细胞（MΦ） 吞噬百分率、吞噬指数等免疫指标。结果:GLP1 和 GLP2 均可使阴虚小鼠体重明显增加（P0.01 或 P0.05 ）；亦能显著促进阴虚小鼠脾脏 AFC 的生成（P0.01 或 P0.05 ）；增强 DTH 反应 （P0.01 ）；对腹腔 MΦ 的吞噬百分率和吞噬指数无明显影响（P0.05 ）；且两种北沙参粗多糖 (GLP1 、GLP2) 的各相同剂量组之间的作用无显著性差异（P0.05 ）。结论:两种北沙参粗多糖 GLP1 和 GLP2 在增强机体免疫功能方面无显著性差异，为改进北沙参的传统加工方法提供了实 验依据。 关键词 北沙参粗多糖；阴虚；免疫 北沙参为伞形科植物珊瑚菜(Glehnia littoralis Fr. Schmidt ex Miq.)干燥根，有养阴清肺、益胃生 津的功效。研究表明.多糖是其中主要成分，可增强机体免疫功能[1，2] 。本实验从采收加工后的北沙 参根中分别提取去皮加工北沙参粗多糖（GLP1 ）和未去皮加工北沙参粗多糖（GLP2 ），进行含量测 定；以甲亢型阴虚小鼠为研究对象，比较 GLP1 和 GLP2 对阴虚小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影 响，揭示其滋阴作用的免疫调节机制，为今后北沙参加工工艺改进和临床应用开发提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 材料 小牛血清（杭州四季青生物材料公司）；甲状腺素（莱阳生物化学制药厂）；利血平（上海医科 大学红旗制药厂）；PRMI 1640 培养液（美国 Gibco 公司）；所用试剂均为分析纯。 J2 －MC BECKMAN 高速冷冻离心机（Bechman 公司）；S22PC 分光光度计（上海棱光技术有限 公司）；HH 型电热恒温水浴锅（江苏金坛市宏凯仪器厂）。 昆明种小鼠,，雄性，6~8 周龄，体重 20±2g （潍坊医学院实验动物中心[动物合格证号:鲁动环字 200007001 号] ）。 1.2 方法 1.2.1 GLP 的提取 分别称取去皮加工和未去皮加工后的北沙参根 250g ，加蒸馏水 1500ml，浸泡 30min，回流提取 5h，抽滤，滤液加 95%乙醇至含醇量达 50%，静置过夜，倾出上清液，离心 5min，用 50%乙醇洗涤 (100ml×3)，50℃烘箱烘干，过 30 目筛，得乳白色GLP 粗制品[3]。 将制得的 GLP 粗品加水溶解，用三氯乙酸法去游离蛋白质，然后置透析袋透析 2d ，换水2 次， - 93 - 炮 制 原 理 去小分子杂质，将沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，离心，置 50℃烘箱烘干，过 30 目筛， 得白色 GLP1 和 GLP2 。 1.2.2 GLP 的含量测定 用硫酸－蒽酮法测得 GLP1 和 GLP2 含量分别为 63.88%和