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( ) 52 动物医学进展　2002 年　第 23 卷　第 6 期 总第 122 期 报告基因在监测基因转移中的应用新进展 孙安赛, 黄广明 ( 1. 西安市高陵县兽医卫生监督检验所, 710200; 2. 张家口农业专科学校生化系, 075000) ( ) 中图分类号: Q 343. 11　　　　　　　　　　　　　文献标识码:A 文章编号: 2002 摘　要: 绿色荧光蛋白(GFP ) 和虫荧素酶( luc) 助因子即可产生活性分子。这些研究结果为 GFP 在 等报道分子的应用使人们能够对基因的转移 生物技术研究领域的应用打开了大门。目前, GFP 己 和表达进行灵敏的监测。对 GFP 进行修饰可 用于基因表达的监测、细胞标记以及蛋白标记定位的 研究。 具有低毒、对正常的细胞无损害等特性, 并 增加其荧光强度和热稳定性, 同时也改变了它 GFP ( 且易于测定 通过荧光显微镜或荧光激活细胞分选仪 的光学特性, 因而使 GFP 在进行基因转移时 ) 。 在生物技术研究领域中的早期应用己有 FA CS GFP 发挥出更大的作用。成像技术的改进及其在生 人进行过综述 P rashu r ( 1995) , 这里所要讨论的主要 物学研究方面日益广泛的使用, 推动了 luc 在 问题是GFP 作为遗传上可编码的标基因在监测基因 基因转移, 尤其是在基因表达过程中进行基因 转移过程中的改进和应用。 筛选以及在监测温度变化时的应用。 1. 1　绿色荧光蛋白的修饰 关键词: 报告基因; 基因转移; 绿色荧光蛋白; 人们用各种方法对 GFP 进行了修饰。据报道, 突 虫荧素酶 变体增加了荧光强度和热稳定性[ 1, 2 ] , 促进了生色团 从实用意义上来说, 基因转移不仅包括对目的基 的折叠、形成, 以及隐性内含子的切除, 其光学性质也 因转移的成功与否进行监测, 而且包括预期的转基因 得到了改善。由于这些修饰的共同作用, 使得人们收 到了许多意想不到的效果。 65 突变体较野生型 表达模型的建立。这种转化体的检测和筛选往往存在 S T 很大的困难。由于应用以 GFP 和 luc 为基础的报告道 GFP 具有更强的荧光性, 对光漂白作用亦有更强的抵 [ 2 ] 子能够对转入基因的表达进行灵敏而无害的监测, 因 抗力。H eim 等 诱导 GFP 突变产生了