HPLC法测定芦丁中芦丁和槲皮素的含量.docVIP

HPLC法测定芦丁中芦丁和槲皮素的含量 李启彬1，刘涛2，曹晓庆，李青丽（1．河南省驻马店市药品检验所，驻马店463000； 2．河南天方药业股份有限公司，驻马店463000） 摘要：目的 利用HPLC测定芦丁中芦丁和槲皮素的含量。方法 采用Zorbox SBC18色谱柱，流动相为水-甲醇-乙酸（45:50 :5），流速1.0ml · min-1　,检测波长256nm。结果 芦丁在60 ~ 140μg · ml-1 浓度范围内，线性关系良好，r =1.00 000， 槲皮素在2.4 ~ 5.6μg · ml-1 浓度范围内, 线性关系良好，r=0.99998。芦丁的平均回收率为99.3%，RSD为0.6%，槲皮素的平均回收率为99.6%，RSD为0.4%。结论 本法结果准确，重复性良较好，方法简便可行。 关键词：芦丁；槲皮素；HPLC Determinaition of Rutin and Its Quermination by HPLC LI Qi-bin1，LIU Tao2， CAO Xiao- qing，LI Qing-li（1. Zhumadian Institute of Quality Control of Drug, Zhumadian 463000,China；2. Henan Topfond Pharmaceutical Co.,Ltd Zhumadian463000,China） ABSTRACT: OBJECTIVE A HPLC method for the determination of rutin and its quermination was established. METHODS A zorbox SBC18 column was used，with the mobile phase of water-methanol-Vinegar(45：50：5)， at the flow rate of 1.0ml · min-1，the detection wavelength was 256nm. RESULTS The linear range of rutin (r=1.00000) was 60~140ug·ml-1，and quermination (r=0.99998) was 2.4~5.6μg · ml-1 ，The average recovery of Rutin was 99.3%，RSD0.6%，and quermination was 99.6%，RSD0.4%.CONCLUSION It was accurate and rapid. KEY WORDS： rutin； quermination； HPLC 芦丁又名芸香苷、芸香苷是从槐米中提取的一种浅黄色或微绿色针状结晶或粉末。它具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用。主要用于防治高血压病的辅助治疗。同时，它又是合成曲克芦丁的主要原料。现行卫生部药品标准采用紫外分光光度法测芦丁含量，用纸层析法测槲皮素的含量，方法复杂，操作费事，并且槲皮素无法定量，而用HPLC法操作简便，结果准确。 1 仪器和试药 1.1 仪器 高效液相色谱仪： Agilent 1100系列二级管阵列检测器，HP ChemStation化学工作站，Agilent 1100系列自动进样器，Agilent 1100系列柱温箱，Agilent 1100系列双元泵。 1.2 试药 甲醇（Tedia Company，Inc.USA）为色谱纯，乙醇、乙酸均为分析纯.；芦丁（批号：040609、040908、041107），河南省平舆天聚化工厂，芦丁对照品和槲皮素对照品（均为中国药品生物制品检定所，含量均为100.0%） 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Zorbox SB C18 4.6 mm×150mm，5μ。流动相：水 -甲醇- 乙酸 （45 :50 :5），柱温35℃，流速1.0ml·min-1　，检测波长256nm，进样量20μl照“2.1.1”和“2.2.2”项下方法制备对照品、供试品溶液，各进样20μl记录色谱图（图1），保留时间分别为芦丁2.56 min，槲皮素5.831min，其分离度为14.8。理论板数均不低于2000（芦丁8700，槲皮素4800） 2.2 样品溶液的配制 2.2.1 对照品溶液的配制 取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品200.0mg和槲皮素对照品8.0mg，置同一100ml量瓶中，用流动相超声溶解，并稀释成芦丁0.1mg·ml-1 ，槲皮素4