美洲幼虫腐臭病二温式 PCR 诊断方法的建立及应用.pdfVIP

新疆农业科学 2015,52(2) ﹕288—291 Xinjiang Agricultural Sciences doi：10.6048∕j.issn.1001—4330.2015.02.016 美洲幼虫腐臭病二温式PCR诊断方法 的建立及应用 1 1 2 3 何晓杰 ,阿曼吐尔•阿黑哈提 ,叶尔保勒 ,史秀丽 , 齐鑫 ,皮志媛 ,王振宝2 1 2 (1.伊犁职业技术学院,新疆伊宁 835000；2.伊犁出入境检验检疫局,新疆伊宁 835000； 3.新疆维吾尔自治区蜂业发展中心,乌鲁木齐 830054) 摘 要：【 目的】为建立蜂及蜂产品中美洲幼虫腐臭病(AFB)二温式PCR诊断方法。 【方法】选取幼虫芽孢杆 菌基因保守序列设计一对特异性引物,优化反应参数,进行特异性﹑敏感性和重复性试验验证,建立了诊断 AFB PCR 。 【 】 130 bp , 100％,DNA 的二温式 方法 结果 扩增出 的特异性片段 与参考株序列相似性为 灵敏度检 33 fg∕PCR , 。 40 50 测幼虫芽孢杆菌达到 体系 重复性良好 应用该方法对 份实验室模拟样本和 份临床样本进 , 。 【 】 ﹑ ﹑ , AFB 行了检测 与预期结果一致 结论 该方法具有特异 灵敏 准确等优点 可用于蜂及蜂产品中 的快速诊 断。 ： ； PCR； 关键词 美洲幼虫腐臭病 二温式 建立 中图分类号：S89 文献标识码：A 文章编号：1001—4330﹙2015﹚02—0288—04 Establishment of a Two —temperature PCR Assay for Detection of American Foulbrood 1 1 2 3 HE Xiao—jie ,Amantuer Aheihati ,Yeerbaole ,SHI Xiu—li , QI Xin ,PI Zhi—yuan ,WANGZhen—bao2 1 2 ( 1.Yili Vocational and Technical College ,Yining 835000,China ；2.Yili Entry —Exit Inspection and Quar_ antine Bureau ,Yining 835000,China ；3.Apiculture Development Center ,xinjiang Uygur Autonomous Region , Urumqi 830054,China ) Abstract ：【Objective 】To establish a method for American foulbrood detection in bees and bee products