波动性高糖对大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响.pdfVIP

第3 8 卷第5 期 温 州 医 学 院 学 报 Vol.38 No.5 第23080 8卷年9 月 Journ温al o州f We医nzh学ou M院ed学ical报College Sep第.20508期 ·论 著 · 波动性高糖对大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响 田晓玲，郑景晨，章海凌，沈飞霞，刘芳 (温州医学院第一附属医院 内分泌科，浙江 温州 325027) [摘　要]目的:对比研究波动性与稳定性高糖对肾小球系膜细胞 （GMC）氧化应激的影响。方法:体外培 养大鼠肾小球系膜细胞株，分正常糖对照组(5.5mmol/L，NG)、稳定高糖组(25mmol/L,HG)、波动性高糖 组 （5.5mmol/L或25mmol/L，每24h交替，IHG），培养GMC 6d，分别以二氢二氯荧光素 （DCFH-DA）标 记细胞，通过流式细胞仪检测细胞内二氯荧光黄(DCF)的荧光强度而测得细胞内ROS水平，比色法检测细 胞上清液中的总超氧化物歧化酶 （T-SOD）活性和谷胱甘肽 （GSH）、丙二醛(MDA)含量的变化。结果:与NG 组相比，HG组与IHG组细胞内DCF平均荧光强度均显著升高 （均P＜0.01），总SOD活力均下降（均P＜0.01）， GSH含量均下降 （P＜0.05，P＜0.01），MDA均升高 （P＜0.05，P＜0.01）。与HG组相比，IHG组细胞内 DCF平均荧光强度显著升高 （P＜0.01），总SOD活力下降 （P＜0.01），GSH含量下降 （P＜0.01），MDA升 高 （P＜0.05）。结论:波动性高糖较稳定性高糖可能对GMC有更强的氧化损伤效应。 [关键词] 波动性高糖；肾小球系膜细胞；氧化应激 [中图分类号]　R33[文献标识码]　A [文章编号]　1000-2138(2008)05-0422-03 in vitroTIAN Xiao-ling，ZHENG Jing-cheng，ZHANG Hai-ling，SHEN Fei-xia，LIU Fang. Department of Endocrinology，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou，325027 Abstract:Objective: stress in cultured Rat Glomerular Mesangial Cells（GMC）.Methods:GMC were cultured innormal glucose control group（5.5 mmol/l glucose，NG），high glucose group（25 mmol/l glucose，HG）andintermittent high glucosegroup（ ，IHG）invitro for 6 days.2’，7’-dichlorofluorescein diacetate（DCFH-DA）was used as a reactive oxygenspecies(ROS) capture agent．The fluorescent intensity of 2’，7’-dichlorofluorescein（DCF），which was the product of cellular oxidation of DCFH-DA，was detected by flow cytometry， ． The activity of total superoxide dismutase（T-SOD）and the levels of ma1ondialdehyde（MDA），glutathione （GSH）in supernatant were assayed using chromatometry. Results: Compared with NG group，the intracellu- P＜0.01