厄贝沙坦对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中Wntβcatenin信息途径表达的影响.pdfVIP

·1630· Bulletin2009Dec；25(12)：1630～4 中国药理学通报ChinesePharmacological 厄贝沙坦对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中 Wnt／13一catenin信号途径表达的影Ⅱ向 闫蘸1’2，姚芳2，张丽萍1，刘力强3，郝军2，傅淑霞’，段惠军2 (1．河北医科大学第二医院肾内科，河北石家庄050000；2河北医科大学病理学教研室，河北石家庄050017； 3．河北医科大学第二医院神经外科，河北石家庄050000) 中国图书分类号：R-331；R322．61；R329．24；R341；R394．2； 靶基因表达，提示该途径可能参与了肾间质纤维化 R977．6 过程一J。但在肾小管上皮细胞转分化过程中WnL／ 文献标识码：A文章编号：100l一1978(2009)12—1630—05 B．catenin信号途径表达水平还未见报道。血管紧 摘要：目的探讨Wnt／[1一catenin信号途径在高糖诱导肾小 管上皮细胞转分化中的表达及血管紧张素受体拮抗剂 表达，并降低纤维连接蛋白及Ⅳ型胶原表达而发挥 (ARB)厄贝沙坦对该途径活性的影响。方法体外培养人 肾脏保护作用【3J。有关ARB药物对肾脏细胞Wnt 近端肾小管上皮细胞(HKC)，分为正常糖组、甘露醇对照 组、高糖组、高糖+厄贝沙坦干预组。采用免疫细胞化学观 信号途径的作用还不十分明了。本研究旨在观察高 察B-连环蛋白(B-eatenin)表达情况；Western印迹检测 Wnt4、B—catenin、E-钙粘蛋白(E-cadherin)和Ot．平滑肌肌动蛋nin表达水平及厄贝沙坦对其活性的影响，以探讨 白(Of．一SMA)表达水平；逆转录一聚合酶链反应检测Wnt4和 B-cateninmRNA表达水平。结果高糖组较正常糖及渗透 可能的肾脏保护机制。 浓度对照组Wnt4蛋白及mRNA、d．SMA蛋白表达增高，E— 1材料与方法 cadherin表达降低，13-catenin总蛋白及mRNA水平无明显变 1．1材料人近端肾小管上皮细胞系HKC(解放 化，细胞质及核蛋白表达增强。Wnt4和13一catenin核蛋白表 军总医院陈香美教授惠赠)，厄贝沙坦(粉剂)浙江 达在高糖诱导24h达高峰；厄贝沙坦下调Wnt4、a-SMA及 华海药业公司馈赠。D一葡萄糖(美国Sigma)，羊抗 B．catenin核蛋白表达，升高E-cadherin表达水平。结论 Wnt4多克隆抗体、兔抗仅一SMA多克隆抗体(美国 Wnt／13．catenin信号途径可能参与了高糖介导的肾小管上皮 细胞转分化过程。厄贝沙坦可能通过调节Wnt／p—catenin信 号途径活性而抑制该过程。 cadherin多克隆抗体(美国SantaCruz)。核蛋白内 参兔抗Histone H1多克隆抗体购自博士德生物工程 关键词：Wnt4；B一连环蛋白；E-钙粘蛋白；iX一平滑肌肌动蛋白； 上皮细胞转分化；厄贝沙坦 标记羊抗兔、抗小鼠及兔抗羊IsG购自北京中杉金 桥公司。核蛋白提取试剂盒购自凯基生物科技发展 肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化(epith