离子对反相高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠含量及其有关物质.pdfVIP

第34 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第6 期 2006 年6 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 835 ～ 838 离子对反相高效液相色谱法测定 阿仑膦酸钠含量及其有关物质 # 蒋 晔 谢 赞 张嫡群 （河北医科大学药学院分析化学教研室，石家庄050017 ） 摘 要 以挥发性的正戊胺作为离子对试剂，采用离子对反相高效液相色谱法，配以蒸发光散射检测器 （ELSD ）检测，建立了用于阿仑膦酸钠含量测定及相关物质检查的分析方法。以Iintersil C 柱为固定相，流动 8 相为50 mmol/ L 正戊胺水溶液（用乙酸调节pH 至7 . 0 ）- 甲醇（98:2 ），流速为1. 0 mL/ min ，柱温为室温。方法 的线性范围为200 ～ 1000 mg/ L ；回归方程为 lgA = 2 . 5884lgC - 0 . 243 ，r = 0 . 9990 ；方法的平均回收率为 100. 4 % ；RSD 为0 . 65% 。在该色谱条件下，阿仑膦酸钠与其有关物质（包括残留的合成原料亚磷酸及氧化分 解产物磷酸盐）的分离良好，且样品测定不受辅料干扰。样品测定结果满意。本法不需特殊的样品处理过 程，快速，特异性好，适用于阿仑膦酸钠的常规检测及有关物质检查，为该药的质量控制提供了可靠的分析手段。 关键词 阿仑膦酸钠，离子对色谱，蒸发光散射检测器 1 引 言 阿仑膦酸钠（Alendronate ）为第三代双膦酸类药物，临床上用于治疗骨质疏松、变形性骨炎、恶性肿 瘤所致高钙血症及肿瘤骨转移性骨痛等疾病［1］。阿仑膦酸钠分子结构中含有两个膦酸基团，极性强， 易电离，不能在反相色谱柱上保留；由于其结构中无生色团，因此不能直接用常规的紫外检测器和荧光 检测器测定。目前该药物的分析方法有酸碱电位滴定法［2 ］ ［3 ］ ［4 ］ 、钼黄 或钼蓝 比色法、离子交换色谱 ［5 ～ 7 ］ ［8 ］ ［9 ～ 11］ ［12 ］ 法 、毛细管电泳法 及柱前 或柱后 衍生的RP-HPLC 法。但这些方法均不能同时检测阿仑 膦酸钠合成过程中残余的原料亚磷酸和分解产物磷酸盐等有关物质，这些有关物质的存在影响了临床 用药的安全有效性，因此应予以控制，但由于其同样无可检测的生色团且极性较强，它们的保留及检测 问题难以解决。目前关于研究阿仑膦酸钠及其有关物质同时分离检测的色谱分析方法未见报道。本实 验采用离子对反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法（RPIC-ELSD ）测定了阿仑膦酸钠及其制剂的含量， 并对其有关物质进行了研究。该法有效解决了阿仑膦酸酸钠及其有关物质的保留、分离与检测问题，避 免了复杂的样品预处理过程。方法简便快速，准确可靠，为阿仑膦酸钠原料药和制剂的常规检查及质量 控制提供了较好的分析手段。 2 实验部分 2 . 1 仪器与试剂 液相色谱仪系统：SP8810 高效液相色谱仪（美国光谱物理）、Waters 2420 型蒸发光散射检测器（美 国Waters 公司）；HW-2000 色谱工作站（南京千谱软件有限公司）。阿仑膦酸钠对照品（纯度为 99. 7 % ）、阿仑膦酸钠原料药、阿仑膦酸钠片剂均由河北医科大学生物医学工程中心提供；正戊胺（纯度 99% ）（美国Acros Orgaincs 公司）；亚磷酸、磷酸二氢钾均为分析纯，实验用水为二次重蒸水，甲醇为色 谱纯（美国Tedia 公司）。 2. 2 色