黄瓜花叶病毒2a基因上两个氨基酸共同决定其在豆科植物上引发过敏反应.pdfVIP

( C 辑) 第32 卷 第4 期 SCIENCE IN CHINA ( Series C ) 2002 年8 月 黄瓜花叶病毒2a 基因上的两个氨基酸共同决定 其在豆科植物上引发的过敏反应* ** 陶小荣 周雪平 李桂新 于嘉林 浙江大学生物技术研究所( ,杭州 310029) 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室( , 北京 100094 ) 摘要 过敏反应(hypersensitive response, HR)是植物对病原物侵染的一种抗性反应. 对黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)在豆科植物上引发HR 反应的相关因子 进行了研究, 证明 CMV 2a 基因中的243 个碱基决定了过敏反应. 进一步对该区域进 行了分析和点突变研究, 用豆科系统侵染株系CMV-P1 的631 位氨基酸酪氨酸(Tyr)替 换豆科局部坏死株系 CMV-Fny 的相应位点氨基酸苯丙氨酸(Phe)后得到的突变体(Fny- F/Y)在豆科植物上引发 HR 反应, 但过敏枯斑能够向外扩展; 用 CMV-P1 的641 位氨 基酸丝氨酸(Ser)替换 CMV-Fny 的相应位点氨基酸丙氨酸(Ala)得到的突变体(Fny-A/S) 在豆科植物上引发的HR 反应与CMV-Fny 引发的症状没有差异; 当这两个位点同时被 置换后得到的突变体(Fny-FA/YS)在豆科植物接种叶上就不再引发 HR 反应, 而是产生 系统侵染, 说明CMV 在豆科植物上引发的过敏反应是由CMV 2a 基因上的631 和641 位氨基酸共同决定的. 关键词 过敏反应 黄瓜花叶病毒 复制酶基因 豆科植物 过敏反应是广泛的植物抗性反应, 在这一过程中, 木质素与胼胝质在细胞壁内沉积, 植 保素产生, 细胞程序化死亡(programmed cell death, PCD) 机制被活化及致病相关蛋白 [1,2] (pathogen- related protein, PR)诱导表达 . 细菌 真菌和病毒引发的HR 反应会激活广谱的 [3] 抗性反 应 系统获得抗性, 这种抗性是非特异性的, 对很多种病原物都具有抗性 . HR 反应通常把病原物限制在被侵染位点. 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)为二十面体粒子, 直径28 nm. CMV 具有广 [4] 泛的寄主范围, 能够侵染85 科365 属1000 多种植物 , 它含有5 个ORF, 分别位于3 条基因 组RNA 上. 本实验室鉴定分离了两个CMV 株系, 豆科局部坏死株系( 以CMV-RB 和CMV-Fny 为代表)在4 种豆科植物上引发 HR 反应; 豆科系统感染株系( 以CMV-P1 为代表)在这些植物 [5] 上为系统花叶 . 我们曾通过CMV-Fny 的全长cDNA 侵染性克隆pFny 与CMV-P1 进行重组 分析证明这两个株系在豆科植物上的致病性差异是由CMV