bFGF对新生大鼠缺氧缺血后海马CA 1 区神经细胞凋亡的影响.pdf

堑生』L拄壁圭塑!至里!§鲞里!塑 1 bFGF对新生大鼠缺氧缺血后海马CA 区神经细胞凋亡的影响 月 孙桂莲胡宛如中国医科大学第一临床学院儿科。R]z 提要为研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对新生大鼠缺氧缺血(HI)后海马 CA 1区神经细胞凋亡的影响，应用新生Wistar大鼠制备缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模 型，用HE染色、电镜厦原位缺口末端标记(TUNEL)法检测bFGF对H【后海马CAI区 神经细胞凋亡的影响。结果显示HE染色、电镜及TUNEL法均证实HI后海马存在选 2和CA 择性神经细胞凋亡，尤以CAl区为重，CA 3区病变较轻。TuNEL检测结果， 005)。因此，bFGF对m后海马CA1区神经细胞确有保护作用。 关键词脑缺氧脑缺血细胞凋亡 号960602。 新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的发 病机制复杂，至今仍无特效治疗，近年来研究 二、方法 表明脑缺血后细胞的死亡有凋亡参与。目前 1．新生大鼠HIBD模型制备：结扎大鼠 解释神经细胞凋亡的机制有两个较为公认的 左侧颈总动脉，恢复2～4小时后置于由氮气 学说：一是基因学说；二是营养理论学说，营 和空气调节，测氧仪监控的常压缺氧舱内(舱 养因子在神经系统的生理和病理中起重要作 温36±1℃，氧浓度8％)，2小时后取出。 用。本文利用新生Wistar大鼠制备HIBD模2．治疗观察：87只鼠随机分治疗组40 型．观察碱性成纤维细胞生长因子(hFGF)对 只、未治疗组42只及正常鼠5只做对照，40 }Ⅱ后海马CAI区神经细胞捅亡的影响。 只HIBD模型鼠缺氧缺血(m)后立即给bFGF 腹腔注射，4000u／KS，每日1次，共4天；42只 材料和方法 鼠HI后立即腹腔注射等量生理盐水做对照， 一、材料 以上鼠均于观察第5天处死。 新生七日龄Wistar大鼠，性别不限，体重 3．透射电镜检查：每个大脑冠状切成四 片，每片再分为4—5块，每块约lcm×lcmx 12．169，共87只，由本院动物实验室提供； Rss一51W型便携式数字测氧仪，上海产；自2cm。经2．5％戊二醛及1％饿酸双重固定后 x60cm有2个进行电镜检查。 制常压缺氧舱，40cm×50cm 2cm×2cm小孔与外界相通，内有电热毽控制 4．光镜检查：经10％中性福尔马林缓冲 舱温，钠石灰吸收舱内水分和c02；程序性细 液固定后，以视交叉、乳头体中部、大脑后缘 胞死亡检测试剂盒，华美生物工程公司产品， 与小脑连接处为切点，将脑冠状切成四片，常 内含末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT)、生物素规石蜡包埋，切片、厚6wn，分别进行HE染 标记的dUTP及亲和素一辣根过氧化物酶色和原位缺口末端标记(TUN