猪弓形虫重组MIC3蛋白单克隆抗体的制备及其初步应用.pdfVIP

畜牧兽医学报2013，44(10)：1622—1628 ActaVeterinariaetZootechnicaSinica doi：10．11843／j．issn．0366—6964．2013．10．016 猪弓形虫重组MIC3蛋白单克隆抗体的制备 及其初步应用 白 昀1’2，王海燕1，王占伟1’2，纪燕3，吴叙苏1，刘冬霞1，邵国青¨ (1．江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术 研究中心，南京210014；2．南京天邦生物科技有限公司，南京211102；3．南京农业大学，南京210095) 摘要：为获得针对猪弓形虫MIC3蛋白的单克隆抗体，为进一步研制免疫金标试纸条提供材料，作者以纯化的重 株，体内诱生腹水法制备McAb，测定其亚类、效价，进行Westernblot分析，并利用胶体金颗粒标记的McAb制备 疫球蛋白亚类均为IgG2a，其EI。ISA腹水效价分别为1：64万和1：192万，Westernblot结果表明，2株McAbs 腹水均能分别与纯化的重组MIC3蛋白和猪弓形虫全虫蛋白中大小为56和38ku左右的蛋白发生特异性反应；用 纯化后McAb标记的胶体金颗粒制备的免疫金标试纸条可以检测到最低浓度为4×104CFU·mL_1的弓形虫速殖 子。本研究为猪弓形虫病的现场诊断提供了有效的方法，显示出很好的临床应用前景。 关键词：岗地弓形虫；MIC3蛋白；单克隆抗体；胶体金 中图分类号：$852．7 文献标志码：A 文章编号：0366-6964(2013)10—1622—07 and ofMonoclonalAntibodiesrMIC3 PreparationPreliminaryApplication against ofToxoplasmagondii BAIYunh 2，ⅥANG Zhan-weih2，JIYan3，WUXu-sul， Hai—yanl，WANG LIU Dong-xial。SHAOGuo-qing“ AnimalDiseases and (1．KeyLaboratoryof DiagnosticImmunologyofMinistryof Research Agriculture·NationalCenter如rEngineeringofVeterinary 210014，China； ofVeterinaryMedicine，JiangsuAcademyofAgriculturalSciences，Na力ing 2．Nn巧ingTianbangBio—industryCo．Ltd，Na巧ing 210095。China) University。Nanjing has an rolein Abstract：MIC3 highimmunoreactivity，andplaysimportant andinvasionfor tohostcells．To themonoclonal Toxoplasmagondii prepare recombinantMIC3(rMIC3)of rMIC3inEscherichiacoli，