DNA甲基化对牛Igf-2r表达的影响及其在克隆牛发育中的作用.pdfVIP

动物学研究2007，OcL28(5)：470—476 CN ISSN02“-5S53 53·1040／Q Researcb ZooIo垂cal DNA甲基化对牛够2，表达的影响及其 在克隆牛发育中的作用 蔡霞，龙健儿+ (上海交通大学附属儿童医院医学遗传研究所，上海20D040) 摘要：目前认为克隆效率低的主要原因是供体核的不完全重编程导致发育过程中一些重要的基因异常表达。 时荧光定量PcR方法对静打基因的表达进行了定量分析；在此基础上，应用亚硫酸盐甲基化测序法检测正常牛 2(DNA mctllvl扯d 及克隆牛脑、肺、心、肝组织堙产打印迹调控区DMR di脏rennally re910n，DMR)及非印迹 调控区3’-ufR(37_uTl虹a髓lated 基因的表达上调。正常牛各组织中，扩2rDMR2区的DNA甲基化程度差异较大，37一uTR区较稳定；与正常牛相 比，克隆牛DMR2区的甲基化程度变化较大，3 7一uTR区无显著性变化。结果表明，DNA甲肇化修饰影响堙产2r 基因的表达。正常牛不同组织中够打基因DMR2区的DNA甲基化程度不同，提示堙产2，基因的印迹调控方式 2表观结构被明显改变，而非印迹调控 在不同组织中可能不同。克隆牛发育过程中，调控埘：2r基因印迹的DMR 区37一uTR则无明显变化，提示埘2r基因印迹调控区被破坏，很可能是导致克隆牛发育异常的一个重要原因。 关键词：够2r；表观遗传：克隆牛：DNA甲基化：基因印迹 文献标识码：A 中图分类号：Q34；Q523 文章编号：0254—5853-(2007)05．0470一07 EffectofDNA in the Methylationon五要产2，．Expression ofCloned Cattle DeVelopment CAIXia．LONGJian—er+ hasacmc谳rolein innonnal Abstmn：Epigenedcreprogrammjng e砒abIishingnucle盯totipotencydevelopInent andincloneda11Imals．InnlecuITent Ine山odofI黜l一吐r眦nuorcscem study111e quantit撕vcPCR(FQ—PCR)wasappⅡed to mRNAin boviⅡe aner wim detect妇口r MadiIl—Darbybdney(MDBK)cellsbeingⅡ℃ated5’．azacytidine(5’一aza，a DNA t11enweuseddlemethodofBisu圻tcDNA DNA methylt啪sferaseinhibi