基于ISSR分子标记的鹰嘴豆遗传多样性分析.pdf

第37卷第3期 中国草地学报 2015年5月 V01．37 No．3 Chinese ofGrassland Journal Mav2015 文章编号：1673—5021(2015)03—0019—07 基于ISSR分子标记的鹰嘴豆遗传多样性分析 靳晓丽，田新会，杜文华+ (甘肃农业大学草业学院／草业生态系统教育部重点实验室／中一美草地畜牧业可持续研究中心，甘肃兰州 730070) 摘要：以来自印度和澳大利亚的16份鹰嘴豆种质为试验材料，应用ISSR分子标记对其进行遗传多样性分析， 为今后鹰嘴豆育种亲本的筛选提供参考。结果表明，7条ISSR引物对所有鹰嘴豆材料进行扩增，共获得60条带，其 材料聚为一类(第HI类)。 关键词：鹰嘴豆；遗传多样性；ISSR分子标记 中图分类号：$542．9 文献标识码：A arietinum 鹰嘴豆(Cicer L．)是一种适宜在冷 的某些抗病基因。随后，Iruela等n o]和Chowdhury 凉地区生长的豆类作物，其籽粒的蛋白质含量高，具 等口u分别将ISSR技术用于研究鹰嘴豆的进化关系 有较高的经济价值。由于多种生物和非生物胁迫， 和鉴别不同品种及其亲缘关系，并与RAPD技术进 限制了鹰嘴豆产量的提高。鹰嘴豆育种者在培育新 行了分析比较。结果表明，ISSR均表现出了较高的 品种时，往往选择本身性状突出的种质和某些优良 DNA多态性，且稳定性强、技术操作简单，是鹰嘴豆 品种的亲本进行杂交，这样可利用优良种质的数量 遗传多样性和种质资源鉴定的有效手段。本文拟存 不断减少，遗传基础变窄，因此了解鹰嘴豆种质的遗 前期研究[1纠基础上对16份鹰嘴豆种质进行遗传多 传多样性及其亲缘关系，可为鹰嘴豆育种奠定基础， 样性和亲缘关系分析，旨在为鹰嘴豆育种筛选适宜 尤其在亲本选配和防止遗传基础变窄方面具有一定 的亲本，为鹰嘴豆育种奠定基础，并为ISSR技术在 参考意义。 鹰嘴豆上的进一步应用提供科学依据。 许多分子标记技术已被用来检测植物的遗传变 l材料与方法 异性。常见的多采用同工酶、RFLP(扩增片段长度 多态性)以及大量的以PCR为基础的遗传标记，如1．1供试材料 供试材料为16份鹰嘴豆种质(表1)，2011年3 RAPD(随机扩增多态性DNA标记)、SSR(简单序 月29日种植于甘肃农业大学牧草试验站，4月25 列重复)、AFLP(扩增片段长度多态性)以及ISSR (内部简单序列重复)。种子蛋白电泳[1]和同工酶分日采集幼嫩叶片，用液氮保存带回实验室，置于 析[23已被用来确立鹰嘴豆属间的亲缘关系。Ah—-80℃冰箱中备用。 1．2基因组DNA提取 mad等u1利用RAPD标记研究了鹰嘴豆属植物种 问的亲缘关系和系统发育关系，国内也有研究者采 基因组DNA提取采用王关林的CTAB法L1…。 用RAPD技术对鹰嘴豆进行了品种鉴定和聚类分1．3 ISSR引物筛选 从田间选取2个形态差异较大的鹰嘴豆种质 析[4]。Serret等[53和Winter等[61分别利用以微卫 星为基础的RFLPs和STMSs标记分析了鹰嘴豆