卵巢质量和保存液对牛卵母细胞体外发育能力的研究.pdfVIP

and 20t2年篇48蜷篇{s期 繁鹱笺瑾·Reproduction Physiology 卵巢质量和保存液对牛卵母细胞体外发育能 力的研究 乔利敏1，雷莉辉1，乔富强2，姚华”，张京和，，侯引绪1，关伟军。+ (1．北京农业职业学院畜牧兽医系，北京102442；2．北京农学院科技产业集团，北京102206；3．北京农学院 动物科学技术学院，北京 102206；4．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100193) 2 摘要：为研究卵巢质量和保存液对牛卵母细胞孤雌发育能力的影响，本实验将采集卵巢按其质量分为A、B 组，于生理盐水中运输到实验室，利用切割法采集卵巢表面卵泡中的卵母细胞培养，成熟后孤雌激活；将采集牛卵 巢随机分到D-PBS保存液与生理盐水中，运送到实验室后采集卵母细胞培养。以卵母细胞的成熟率、孤雌胚的卵 裂率、囊胚率来评价卵巢质量、保存液对卵母细胞发育能力的影响。结果表明：A组卵巢平均获得的卵母细胞数 (2．1枚)显著低于B组卵巢获得的卵母细胞数(5．5枚)，从A组卵巢上获得的卵母细胞成熟率(56．98％)、卵裂率 (31．50％)(P0．05)；使用含离子丰富的D—PBS溶液，较对照组保存液生理盐水，其卵母细胞的成熟率、卵裂率及 囊胚率均没有显著差异(P005) 关键词：卵巢保存；卵母细胞；发育能力；牛 中图分类号：$823．3 文献标识码：B 文章编号：0258—7033(2012)15—0026—03 目前，胚胎生物技术研究主要是从屠宰场收集 况、年龄、繁殖状态、子宫生殖疾病及外源激素使用 卵巢，要求在卵巢离体后不超过6h尽快送到实验 等因素影响，采集卵巢质量也不同。所以，取得离体 室【1】，然后采集卵母细胞进行成熟培养及后续研究。 后生物活性较好且保存良好的卵巢，其卵母细胞就 但所采集卵巢贮存条件(保存温度、时间、保存液及 会有较强的生命力及活性，有利于体外成熟及后续 所处性周期等)对卵母细胞体外成熟及孤雌胚体外 研究。为此，本研究就卵巢质量和保存液对牛卵母 发育的影响还存在争议[2-5]，由于缺乏血液循环以至细胞发育能力的影响进行研究，旨在完善和优化牛 缺氧和代谢毒物聚积【2】，加之牛自身品种、健康状 卵母细胞体外成熟的进一步研究工作提供参考。 1材料与方法 收稿日期：2011-12—02；修回日期：2012—02—17 资助项目：北京市奶牛创新团队资助 1．1 材料除特别标识外，所有化学试剂均购自 作者简介：乔利敏(1972一)，女，山西河曲人，硕士研究生，讲师 +通讯作者 1858—1867． 196—202． F M．Roleof cAMP J，TsafririA，Conti B，et affects [4]Richard phosphodiesterasetype [7]KimJ，Cho a1．Exogenous