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生物技术与发酵工程应用 李斌(工程硕士) 摘 要 本文概述了现代生物技术的四大领域，并介绍了各领域的研究应用。 关键词 生物技术 基因工程 细胞工程 酶工程 发酵工程 生物技术是影响未来国计民生的四大科学技术支柱之一，它对于提高国力，帮助解决人类所面临的食品短缺、健康、环境及经济问题至关重要，被认为是21世纪世界知识经济的核心。现代生物技术，是利用动植物、微生物等生物有机体或其组成部分发展新工艺或新产品的一门科学技术体系，分为基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程四大领域。现代生物技术的发展仅有30多年的时间，但已经在生命科学研究及产业化方面产生了巨大的影响，已不断渗透到人类社会的生产、生活的各个方面并建立了不可分割的联系。 1 基因工程 基因工程又称DNA重组技术，是指对不同生物的遗传基因，根据人们的意愿进行基因的切割、拼接和重新组合，然后再转入生物体内，产生人们所期望的产物或创造出具有新的遗传特征的生物类型。基因工程使得人类可以克服物种间的遗传障碍。定向培养或创造出自然界所没有的新的生命形态，以满足人类社会的需要。 基因工程在农业生产中已得到广泛的应用。根据人类的需要把特定基因导人植物体，可以达到改良品质、增加产量以及获得具有抗病、抗虫或抗除草剂植物的目的。目前应用最广的抗虫基因是苏芸金芽抱杆菌(Bt)晶体毒蛋白基因。Bt基因已被转人棉花、玉米、烟草、番茄、马铃薯、水稻等多种作物，并取得了良好的效果[1]。我国是世界上第二个具有转基因抗虫棉花自主知识产权的国家。据统计，1999年至2006年间，全国累计推广国产转基因抗虫棉1.56亿亩，为国家和农民增收节支40 亿元人民币。此外，华中农业大学番茄课题组利用乙稀形成酶的反义基因抑制催熟剂乙烯的释放，获得耐贮藏转基因番茄“华番一号”，在25℃条件下可贮藏40-50天。北京大学植物基因工程实验室利用矮牵牛基因，首次在我国培育出转基因蓝色玫瑰。 基因工程在畜牧业上也得到广泛发展。例如利用鼠类有关促进角蛋白形成的基因获得了经遗传改良的绵羊，这种绵羊比普通棉羊产毛量提高6%左右[2]。最近美国科学家通过转基因技术，将深海鱼中含有的一种不饱和脂肪酸基因转移到了猪的基因组中。食用这些转基因克隆猪的猪肉，可预防心血管疾病。 将人体正常基因直接导人遗传缺陷人体，通过控制目的基因的表达来抑制或补偿缺陷基因，可恢复受体细胞、组织或器官的生理功能，从而达到治疗疾病的目的，这就是基因治疗。自1990年美国批准了第一例临床基因治疗试验以来，基因治疗已从单基因遗传病扩展到多个病种范围，治疗的各种病例数约500个。目前，基因治疗已从实验室研究阶段进人临床试验与应用阶段。复旦大学基因治疗课题组，开展了大量的血友病B的基因治疗研究，并于1991年开展了首例血友病B患者基因治疗的临床实验，取得了安全、有效的治疗结果[3]。 2 细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的一门科学技术。 通过植物组织培养，可以快速繁殖、培育脱毒的种苗，还可以通过大规模的植物细胞培养来生产天然有机化合物，例如天然药物、蛋白质、脂肪、糖类、香料、生物碱及其他活性物质。植物体细胞杂交则可以将两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并且把杂种细胞培育成新的植物体[4]。袁隆平运用体细胞杂交技术获得了具有远缘杂种优势的超级杂交水稻，亩产可达160斤。他的下一步目标是到2010年实现大面积示范亩产180斤。 在动物细胞工程方面，通过细胞融合将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合形成能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。单克隆抗体具有专一性和灵敏性，在病原检测和疾病治疗以及食品安全领域具有广阔的应用前景。用单克隆抗体可以检测出多种病毒中非常细微的株间差异，鉴定细胞的种型和亚种，而这些都是传统血清法或动物免疫法所做不到的。过去制备疫苗是从动物组织中提取，现在通过体外培养经过诱变或转基因的细胞可用于生产各种疫苗、菌苗、抗生素和生物活性物质等生物体中间代谢产物或分泌物[5]。目前，人工受精、胚胎移植等技术已广泛应用于畜牧业生产，液氮超低温(-196℃)保存精液和胚胎，使优良畜、禽的交配数量与交配范围大为扩展，突破了交配季节的限制。另外，在细胞水平上改造卵细胞，可创造出高产奶牛、瘦肉型猪等新品种。结合流式细胞仪可分离出良种奶牛带有X染色体的精子，与奶牛卵细胞融合后移植到普通黄牛子宫中可以起到“借腹生子”的效果。这种胚胎移植新技术极大地加快了奶业发展的步伐，提高了养殖业的经济效益。 3 酶工程 酶工程是指在一定的生物反应装置中，利用酶所具有的生物催化功能将相应的原料转化成有用物质的一门科学技术。主要包括微生物细胞发酵产酶、动植物细胞培养产酶、酶的提取