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免疫组织化学方法测定胰腺中胰岛β细胞 重庆工商大学 生物工程 09级 生物班 曾燕红 指导教师 殷菲 摘要：2 型糖尿病主要发生于成年人,是一种常见的代谢性疾病，其主要的特点是胰岛素抵抗和胰腺β细胞功能下降或数量减少导致胰岛素分泌不足，是具有明显异质性的多因素、多基因遗传病,环境因素和遗传因素的共同作用促进了糖尿病的发生。由于胰腺β细胞在胰腺细胞中的比例很低，观察和定位胰腺β细胞是考察一些药物对β细胞数量和活力的影响具有十分重要的作用，本文利用免疫组织化学方法测定胰腺中胰岛β细胞。通过多实验条件和方法的反复摸索，我们成功的用免疫组化方法观察到胰岛β细胞，并用双标的方法进行了确定。 关键词：2型糖尿病，胰腺β细胞，免疫组织化学 Abstract: Type 2 diabetes mellitus occurs mainly in adults and is a metabolic disorder that is characterized by high blood glucose in the context of insulin resistance and relative insulin deficiency caused by decrease of pancreatic β cells mass or the increase of β cells apoptosis. Type 2 diabetes is a significant heterogeneity of multi-factor, multi-gene genetic diseases, environmental factors and genetic factors together contributed to the occurrence of diabetes. because the ratio of beta cell is really low in pancreatic cells, which is around 1%, so observation and identification is very important to revalue the effect of some compounds on pancreatic cells. In this study, we constructed a useful method to observe the pancreatic beta cells with immunohistochemistry staining. After tried again and again, we found pancreatic beta cells, which were made sure by double-staining with DAPI and antibody for insulin. We also analyzed the factors that interrupted this experiment. Key words: Type 2 diabetes mellitus; pancreatic beta cells; Immunohistochemistry 目录 1前言 3 1.1 2型糖尿病的概述 3 1.1.1 2型糖尿病的发病人群 3 1.1.2 2型糖尿病的发病机制 3 1.2 2型糖尿病的研究进展 3 1.2.12型糖尿病的遗传学研究 3 1.2.2 2型糖尿病的治疗研究新进展 4 1.3 2型糖尿病的其他治疗方法 6 1.4胰岛β细胞的研究 6 1.4.1胰岛β细胞功能评价的方法 6 1.4.2胰岛β细胞功能评价的相关指数 7 1.4.3用于评估胰岛素敏感性的相关指数 8 1.5 本课题研究的主要内容 9 2实验部分 9 2.1 主要材料 9 2.1.1 实验动物 9 2.1.2 实验药品及试剂 9 2.1.3实验仪器和设备 10 2.2 实验原理 10 2.2.1 免疫组化概念 10 2.2.2 免疫组化实验所用的组织和细胞标本 11 2.2.3免疫组化实验所用的抗体 11 2.2.4免疫组化实验常用的染色方法 11 2.3 常用试剂的配制 11 2.3.1 浓缩缓冲液TBS的配制（10×） 11 2.3.2多聚甲醛（PFA）的配制 12 2.3.3 DAPI 的配制 12 2.4 免疫组化实验操作步骤 13 3 实验结果与讨论 13 3.1实验结果 13 3.2讨论 18 4结论与展望 18 4.1结论 18 4.2 展望 19 参考文献 19 致谢 21 1前言1.1 2型糖尿病的概述 1.1.1 2型糖尿病的发病人群2型糖尿病占