禽腺病毒hexon基因克隆表达及间接ELISA与荧光PCR检测方法建立.pdf

法的建立 摘要 禽腺病毒属于禽腺病毒科禽腺病毒属，根据其抗原性的不同可分为3 个群，其中I群禽腺病毒包含12个血清型。I群禽腺病毒含有相同的群抗 原，其中比较著名的病毒株有鸡胚致死孤儿病毒、鹌鹑支气管炎病毒、鸡 包涵体肝炎病毒。所有年龄的家养禽均为易感，临床和病理症候群包括肝 炎、再生障碍性贫血、出血、轻度呼吸道疾病和产蛋量减少。I群禽腺病毒 既可水平传播，也可垂直传播。 比较禽腺病毒hexon氨基酸序列，结合二维结构图提示的多肽暴露情况以 及抗原性预测分析，设计并合成了一对特异性引物，对禽腺病毒1型CELO ．B．D．半乳糖诱导表达，SDS．PAGE电泳分析表明，表达的融合蛋白分子量 hexon重组蛋白具有抗原性，能与感染FAV的阳性血清反应。 另外，分别用不同浓度的尿素和Triton 件分析蛋白的纯度为85．0％。达到较高的浓度和纯度，说明本试验探索的 T 纯化方法能有效的纯化这些重组蛋白。 其次，将纯化的hexon蛋白作为包被用抗原进行间接酶联免疫吸附试 ARV阳性血清发生交叉反应，具有较好的特异性。本研究初步建立了能检 清型