第二章临床血液学检测第一节血液一般检测.ppt

血红蛋白的测定 定义 指单位体积血液中所含血红蛋白的量 参考值 成年男性： 120-160g/L 成年女性： 110-150g/L 初生儿： 170-200g/L 方法： 血液分析仪的发展 60年代，在原基础上增加一个比色系统，可测定血红蛋白。 80年代初，双通道仪器诞生。红细胞和血小板在同一通道计数，白细胞计数为单独通道，使血常规检验扩展为同时进行包括以上8个项目的血液分析项目，国外称之为全血计数(complete blood count, CBC)，但不包括白细胞分类。 80年代中期，根据白细胞大小不同而产生的阻抗值或散射量的不同，已能对细胞进行粗筛分类(两分群或三分群)，且一次可报告13～14个分析参数及红细胞计数、白细胞计数、血小板计数三个直方图。 血液分析仪检测原理 ● 电阻抗法 电阻抗法原理 白细胞计数和分类计数 经溶血剂处理后根据电阻抗原理计数白细胞并进行分群 血红蛋白测定 加溶血剂后，血红蛋白释放，与转化剂结合形成血红蛋白衍生物，用光电比色法求出血红蛋白含量。 ICSH推荐使用氰化高铁法，校正仪器须以HiCN值为标准。 由于氰化物的毒性，非氰化溶血剂应用日益广泛。 血小板测定 2 ~ 28 fl，不同仪器血小板直方图的范围不一 与红细胞在一个系统进行检测 血细胞直方图（histogram） 意义 被测血液中细胞群体的变化，无特异性； 粗略判断细胞比例变化或有无异常细胞出现； 筛选是否需要作血涂片的显微镜检查. 白细胞直方图 红细胞直方图 贫血的鉴别诊断 观察： 图形的位置 峰底的宽度 峰顶的形状以及有无双峰 血小板直方图 平滑正态分布曲线 PLT计数结果应根据WBC、RBC及PLT直方图形态和警告信号进行综合评价. 血小板凝块 凝块越多，PLT ，MPV . 大于35 fl的PLT计入RBC内. 小于RBC低限的RBC碎片或小RBC均计数为PLT. 血液分析仪的质量控制 血样：静脉血 抗凝：EDTA-K2 结束语 目前血细胞分析仪越来越普遍的应用于各级医院的常规作中，但是并不是说所有的结果都是准确无误的，目前在血细胞形态学方面，无论是五分类还是更多的分类，甚至是具有专门幼稚细胞分析通道的仪器，仍然不能根本解决血液细胞形态学的问题，仍然不能完全以仪器分类结果彻底取代人工分类。 此外仪器一些固有的产生误差的因素还没有彻底解决，某些影响仪器计数准确性的个别因素还存在，或某些仪器具有设计上的缺陷和应用上的局限性，因此无论是细胞计数还是多种参数的分析结果仍然会有问题发生。 不要总是相信仪器，要认真对待每个实验样品和结果，分析判断这个结果，检验工作者要对仪器的性能，质量控制，局限性，常出现的故障，特别对直方图和五分类的散点图有深刻的了解，善于发现问题和解决问题。这一切都有待于通过人们在熟练掌握仪器的性能和不断提高的自己的知识水平上，通过扎实的的显微镜下对血细胞形态学认知的基本功来解决问题。 在一小孔管上端负压的抽吸下，血细胞均匀地抽进小孔，血细胞通过小孔的瞬间，改变了两电极间的电阻，因瞬间引起电压变化而出现一个脉冲信号；血细胞连续通过小孔，电极两端产生一连串电压脉冲，脉冲数与通过细胞数一致，脉冲幅度与细胞体积成正比。 脉冲：在极短时间内出现电压或电流的变化 将所得的脉冲放大、鉴别、整形后送到计数电路可计得细胞数。 脉冲的大小与细胞体积有关，可以根据细胞细胞体积的大小显示出细胞体积分布直方图。 血细胞脉冲信号与直方图的关系 溶血剂的作用： ① 使红细胞迅速溶解 ② 使白细胞的胞浆通过膜渗出，胞膜紧贴于胞核或颗粒周围 ③ 经处理后的白细胞与自然体积无关，含有颗粒的粒细胞体积大于无颗粒的单核及淋巴细胞 白细胞：35 ~ 450 fl 小细胞群：35 ~ 90 fl，淋巴细胞为主 中间细胞群：90 ~ 160 fl，包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、幼稚细胞或白血病细胞 大细胞群：160 fl以上，主要为中性粒细胞 三分群血液分析仪 正常白细胞分类模式图（直方图） % 35 90 160 300 400 450(fl) 10 20 30(fl) % ↑ ↓ ↓ ↑ ↑ ↑ ↓ 枸橼酸盐抗凝剂时间过长易结晶，细胞形态易发生变化 草酸盐易使血小板产生凝集，并可使白细胞形态发生变化 肝素抗凝过量易引起白细胞凝集和血小板减少 EDTA-Na2较EDT