第三章植物组织与细胞培养的基本原理.ppt

流苏石斛愈伤组织 麻风树愈伤组织 三、影响植物细胞脱分化和再分化的因素 1、培养基：基本培养基、添加物、渗透压 2、外植体： （1）外植体基因型：外植体基因型不同，愈伤组织的诱导及植株再生能力不同； （2）外植体类型：根、茎、叶、花、果等均可作为外植体，但器官分化能力有所不同； （3）外植体发育状态：植物不同部位、不同年龄的外植体，其器官分化能力也不相同（幼态组织较成年组织具有较高的形态发生能力）； （4）外植体大小不同，其器官分化能力也不同（如茎尖培养）; （5）取材季节不同,其器官分化能力也不同； （6）外植体极性 3、植物激素对愈伤组织培养的调控作用 愈伤组织的生长和分化受植物内源激素和外源生长调节物质的控制。 （1）生长素:在植物组织培养中，生长素的作用主要是诱导愈伤组织和根的形成，促进细胞脱分化。 （2）细胞分裂素：组织培养中使用细胞分裂素的目的在于刺激细胞分裂，诱导芽的分化，叶扩大和茎长高，打破顶端优势，促进丛生芽的形成和增殖，抑制根的生长。 （3）脱落酸:脱落酸是另一类高效的生长素，具有控制细胞生长的作用，并与开花反应有着密切联系。 （4）乙烯：有些增殖培养中用于芽的诱导和管胞分化。而管胞分化主要又是器官发生的基础。 4、培养条件的影响 （1）光照 （2）干燥处理 （3）温度 四、器官发生的途径、影响器官发生的因素 1.器官直接发生途径： 在外植体上直接产生不定芽/根，通常由表皮细胞或表皮以下几层细胞脱分化后直接转变为胚性细胞而产生 2.器官间接发生途径： （1）外植体经过诱导形成愈伤组织 （2）生长中心的形成： 当把愈伤组织转移到有利于有序生长的条件下以后，首先在若干部位成丛出现类似形成层的细胞群，称之为生长中心或拟分生组织，它们是愈伤组织形成器官的部位。 （3）器官原基及器官形成： 生长中心形成后，按照其已确立的极性，某些细胞开始分化形成维管组织和器官原基，进而分化出相应的组织和器官。 第三章 植物组织与细胞培养的基本原理 主要内容： 第一节植物细胞的全能性 第二节植物细胞的分化 第三节植物体胚体发生与人工种子 学习的目标与要求： 掌握植物组织与细胞培养的基本原理，了解离体条件下细胞分化和再分化各时期的特点及愈伤组织的生长情况，了解植物体细胞胚胎发生途径及人工种子的意义。 一、植物组织培养 1、植物组织培养的历史： (1)Schleiden 和Schwann、哈贝尔兰德（Harberlandt) 细胞全能性学说 （2）怀特（ White ）、高特里特（Gautheret）和诺比考（Nobercourt）三个是植物组织培养的奠基人。在此基础上建立了植物组织培养的综合培养基，包括无机盐成分、有机成分和生长刺激因。这是随后创立的各种培养基的基 础，同时也建立了植物组织培养的基本方法，成为当今各种植物组织培养的技术基础。 （3）崔徽和斯库格（Skoog) 腺嘌呤/生长素的比例 （4）莫蕾尔（Morel) 脱毒技术 2、植物组织培养的分类 植物组织培养一般分为以下几种： (1)胚胎培养指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养。 (2)器官培养指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养，如根的根尖和切段，茎的茎尖、茎节和切段，叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶，花器的花瓣、雄蕊（花药、花丝）、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养。 (3)组织培养指以分离出植物各部位的组织（如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等），或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养。这是狭义的植物组织培养。 (4)细胞培养指以单个游离细胞（如用果酸酶从组织中分离的体细胞，或花粉细胞，卵细胞）为接种体的离体无菌培养。 (5)原生质体培养指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养 3、植物组织培养的理论基础 植物细胞的全能性（totipotent)：植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。 原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 差异：（1） 受精卵的全能性最高 （2） 受精卵分化后的细胞中，体细胞的全能性比生殖细胞的低。 潜在全能性的原因：基因表达的选择性 科学研究表明，处于离体状态的植物活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，