血清中IgG红细胞血型抗体定量检测方法初探.pdfVIP

·2 16 · 中国输血杂志 2009 年 03 月第 22 卷第 3 期 Ch in J B lood Tran sfu sion M arch , 2009 , Vol. 22 , No. 3 ·实验研究 · 血清中 IgG红细胞血型抗体定量检测方法初探 ( ) 孙继丽 　向东 　王健莲 上海市血液中心 ,上海 200051 　　摘要 : 目的 　探索建立同种免疫患者血清中 IgG红细胞血型抗体定量的吸收放散 EL ISA 技术 。方法 　采用 阴性红细胞平行操作 ,作为空白对照 ,通过吸收 、放散纯化血清中 IgG抗体 ,用 EL ISA 方法测定放散液中 IgG抗体浓 ( ) 度 ,换算成血清中抗体浓度 。采用该方法对 8名孕妇血清中的同种抗体 抗 D、抗 E 各 4 例 进行定量检测 。结果 ( ) μ ( 　EL ISA 法测定 4 名孕妇血清 中 IgG抗 D 浓度范围为 1086—54 7 12 g/m l, IgG抗 E 浓度范围为 0080— ) μ 7646 g/m l。结论 　本研究初步建立的简便 、实用的血清 IgG红细胞血型抗体定量方法 ,可用于准确测定孕妇血 清中 IgG特异性抗体的浓度 。 　　关键词 :吸收放散 ; EL ISA ;定量 ; IgG抗体 　　中图分类号 : R457. 1+ 1　R44661　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 1004549X (2009) 0302 1602 　　对血清中 IgG红细胞血型抗体进行定量检测 ,具有十分 并使用了低离子介质 ,为 4 m l血清 , 1 m l 低离子介质溶液 , 重要的临床意义 ,如监测母体血清中抗 IgG D / E 的抗体含 与 1 m l压积红细胞充分混匀 , 37 ℃孵育 20 m in。 量 ,预判新生儿溶血病严重程度 [ 1—3 ] , 以采取相应治疗措施 。 1. 4　效价滴定 　采用 IA T法同时测定每份血清及其试验组 目前国内多采用间接抗人球蛋 白试验 ( indirect antihum an 放散液的效价 ,使用 5% 白蛋白盐水溶液作为稀释剂 。 ) globu lin te st, IA T 测定抗体效价 ,是一种相对估值 ; 国外普遍 1. 5　EL ISA 检测 　按试验组效价对 2 组血清的放散液进行 采用的自动化血液凝集技术 ,需要使用相应特异性的标准品 倍比稀释后 ,平行进行 EL ISA 测定 ,复孔测定 4 —8次 。同时 作为参照 ,且易受 IgM 抗体干扰 。基于上述因素 ,我们探索 对试剂盒提供的人源参照血清进行梯度稀释 ,复孔测定 ,绘 建立 1种新的吸收放散 EL ISA 方法 , 即采用吸收 、放散纯化 ( ) 制标准曲线 图 1 。具体操作严格按照试剂盒说明书 。 血清中特异性 IgG抗体 ,通过 EL ISA 方法测定放散液中 IgG 抗体浓度 ,从而对血清中特异性