黄附子中性多糖和酸性蛋白多糖的分离,纯化和鉴定.pdfVIP

维普资讯 1 ／ 9 —1， 20 中国生化药物杂志 Chi JournalofBiochemicalPharrnaceutics2000年第 21卷第 1期 黄附子中性多糖和酸性蛋白多糖的分离、纯化与鉴定 阮期平 赵 J ‘ 多 一7／ 摘 要 目的：探讨黄 子中 糖复台物．为深 研完和开发刺月 子提供有月 料。方法：采一 ． 一 提、乙醇沉淀、DEAE一(232厦 SephadexG75柱层折等方法分离黄 附子中的糖复合轴 ．用酚 硫酸法、Folin一酚法厦 硫酸一咔哇法测定其糖 、蛋白质、葡萄糖醛酸的含量 。结果：．V．1ltt附子 中得到两种糖复合物 ．一种为 中性多糖 ，舍 -It为3％；另一种为酸性蛋 白多糖 ．含量为 1％(其 中糖含量97％、蛋白质含量3％、葡萄糖醛酸含量 9％)。结论 ： tt附子中两种糖复合轴 的获得有助于研究附子抗癌 、抗衰老和增强免瘦机能的作用。 关键词 附子，主兰兰苎I 酸性蛋白；糖 t f-一 、 附于是毛茛科乌头属 (Aconitum Carmichaeti 两次上清液 ，于4℃下静止 4h后离心 ，除去不溶性 胁 )植物的侧根，是一种常用 的中药。据 (本草 沉淀 ，得粗提液 。加人 95％乙醇使 乙醇浓度达到 纲 目)记载，附子具有回阳救逆 、温补肾阳、祛寒止 50％，置 41；下静止过夜 ，次 日用 G一5号玻璃砂芯 痛之功能。近年来研 究表 明，附子提取液尚具有 漏斗抽滤 ，再相继以 95％乙醇 丙酮洗涤，真空干 强心、抗癌 、抗 衰老和增强免疫机 能的作用”～41。 燥 ，得粗多糖 (约4g)。 四川是川附子的主要产地，对附子提取液中有效 取粗多糖 1．5g溶解于 300ml蒸馏水中，加入 成分的研究，不仅具有重要的医学价值 ，而且对川 已经处理 的DEAE—C32(OH一型，用量为粗多糖量 附子的综合利用 ，将具有极大的经济价值。本文 的3％)，匀速搅拌 6h。用 G一3号玻璃砂芯漏斗抽 首次报 道 了附子 中性多糖和酸性蛋 白多糖 的提 滤 ，再反复用蒸馏 水洗涤 DEAE—C32、抽 滤 (共 5 取、分离 、纯化及部分理化性质分析，有关其结构 次 ，每次 100m1)，合并所有滤液 (约 800m1)。减压 信息和生物学活性将另题报道。 浓缩 、过滤 ，得液体 5ml。上 SephadexG75柱 (1． 5cm×26cm)，蒸馏水洗脱 (3ml／菅)，分部收集苯酚 1 材 料 一 硫酸法多糖阳性反应的高峰部分 (见图 1)，减压 黄附片，购于本校 中药房 。 浓缩 、乙醇醇析 ，得 PS—I DEAE．C32、SephadexG75，Pharmacia公司；琼 将蒸馏 水洗涤后 的 DEAE—C32装柱 (2em × 脂糖 (电泳纯)，上海东海生化试剂厂；葡萄糖醛 27cm)，用 0．2mol／LNaOH洗脱 (5ml／管)，分部收 酸 ，上海试剂二厂；葡萄糖 ，广州新港化工厂；牛血 集苯酚一硫酸法多糖 阳性反应的高峰部分 ，洗脱 液 清白蛋 白，上海丽珠东风生物技术有限公司；其余 浓缩、过滤