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考题演练·跟踪检测区
1.(2015·威海模拟科学家将人的生长激素基因与某种细菌不含抗生素抗性基因的分子进行重组并成功地在该细菌中得以表达如下图。请据图分析回答
(1)过程①所示获取目的基因的方法是__。
细菌是理想的受体细胞这是因为它_______________________________。
质粒与目的基因结合时首先需要用____________________酶将质粒切开“缺口”然后用____________________酶将质粒与目的基因“缝合”起来。
若将细菌先接种在含有__________________________的培养基上能生长说明该细菌中已经导入外源质粒但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因若将细菌再重新接种在含有____________________________的培养基上不能生长则说明细菌中已经导入了插入目的基因的重组载体。
检测工程菌中的生长激素基因是否转录出和是否翻译出生长激素可采用的技术分别是__________________、________________________。
答案:(1)反转录法
(2)繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少
(3)限制性内切 DNA连接
(4)氨苄青霉素 四环素
(5)分子杂交 抗原—抗体杂交
【易错提醒】(1)在基因工程的四个操作步骤中,只有第三步将重组载体导入受体细胞不需要碱基互补配对,其余三个步骤都涉及碱基互补配对。
(2)原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,有利于目的基因的复制与表达,因此常用大肠杆菌等原核生物作为受体细胞。
2.浙江大学农学院某教授的课题组最新研究发现一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。研究人员发现用油菜素内酯处理后许多参与农药降解的基因如的表达和酶活性都得到提高在这些基因的“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒无毒物质有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作请回答
(1)获得油菜素内酯基因的方法有____________、__________举两种即可。第①步用技术扩增基因时用到的耐高温的酶通常是指______________。步骤②用到的酶有________________________________。
图中导入重组质粒的方法是__________。在导入之前应用____________处理。
导入重组质粒以后往往还需要进行检测和筛选可用__________________制成探针检测是否导入了重组基因在培养基中加入________可将含有目的基因的细胞筛选出来。
请你为该课题命名_____________________________________________。
请你说说该研究发现的生态学意义_______________________________。
【下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料请分析回答下列问题
资料1:巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌,能将甲醇作为其唯一碳源,此时AOX1基因受到诱导而表达[5′AOX1和3′AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。
资料2:巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体,其与目的基因形成的重组载体经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中以实现表达。
资料3:限制性内切酶酶切位点[来源:gkstk.Com]
(1)如果要将基因和质粒重组应该在基因两侧的和位置接上__________、__________限制性内切酶识别序列这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
酶切获取基因后需用__________将其连接到质粒上形成重组载体并将其导入大肠杆菌以获取______________。
步骤中应选用限制性内切酶__________来切割重组载体获得重组然后将其导入巴斯德毕赤酵母细胞。
为了确认巴斯德毕赤酵母细胞转化是否成功在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选转化后的细胞中是否含有基因可以用____________________方法进行检测。
转化的酵母细胞在培养基上培养一段时间后需要向其中加入________以维持其生活同时诱导基因表达。
与大肠杆菌等细菌相比用巴斯德毕赤酵母细胞作为基因工程的受体细胞其优点是在蛋白质合成后细胞可以对其进行________并分泌到细胞外便于提取。
青岛模拟我国科学家成功克隆了控制水稻理想株型的关键多效基因。研究发现基因发生突变后会使水稻穗粒数和千粒重以克表示的一千粒种子的重量增加同时茎秆变得粗
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