ABCELISA法诊断肠螨病的研究(论文资料).pdfVIP

JournalofHealth 16 No10 中国卫生检验杂志2006年lO月第16卷第lO款ChineseLaboratoryTechnology，Oct2006；Vol 【卫生与临床】 ABC—ELISA法诊断肠螨病的研究 张荣波1，黄 勇2，李朝品1 (1．安徽理工大学医学院病原生物学教研室，安徽淮南232001；2．山东省寄生虫病防治所，山东济宁27033) [摘要] 目的：探讨生物素一亲和素酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)在肠螨病诊断中的应用价值。方法：采集48例肠 ELISA法更有效诊断肠螨病。 [关键词】ABC—ELISA；SPA—ELISA；实验诊断；肠螨病 [中图分类号】R446．61 [文献标识码】B [文章编号】 1004—8685(2006)10—1254—02 粉蟥普遍存在于人类的居室和工作环境中，其随食物吞 温育，时间为60 min，同上甩干洗涤；加入生物素羊抗人IgG 人可在人体肠道内生存，或侵入肠粘膜甚至粘膜下层形成溃 疡，引起肠螨病¨“’。目前临床对肠螨病的诊断主要依靠分 (工作浓度1：20)，温育30min后加底物溶液(OPD—H：02)， 37℃30rain后以2mol／L 离粪螨，由于体积小、卵的形态易与钩虫卵等肠道寄生虫卵混 H2SO。终止反应。 淆，造成临床漏检。为探讨快速的免疫学诊断方法，本文采用 1．5．2SPA—ELISA法检测步骤包被抗原浓度和待测血清 稀释度同ABC—ELISA法，操作参照以往文献进行。 生物素一亲和素酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)检测48例 肠螨病患者血清螨特异性抗体IsG，并在相同条件下与葡萄球 1．5．3 阳性判断标准结果用酶标仪在波长492llm下测定 菌A一蛋白酶联免疫吸附试验(SPA—ELISA)进行比较。其OD值，以样品血清(S)与阴性参考血清(N)的比值S／N为 标准。以S／N至2．1为阳性。 1材料与方法 1．6统计分析 1．1血清 ，检验。 肠螨病患者血清48份和健康献血员血清30份。肠螨病 患者以粪检螨或螨卵阳性确诊为实验组；粪检螨及螨卵阴性 2结果 健康献血员血清标本30份由淮南中心盥站提供，为对照组。 2．1一般资料 1．2试剂 获粪检螨阳性48例肠螨病患者，其中男32例，女16例。 ABC—ELISA和SPA—ELISA试剂均为上海生物制品所 检出螨鉴定有8种，粗脚粉螨(Acarussiro)、腐酪食螨(Tyroph— 产(批号分别为990004和990012)。 agu8 farinae)、屋尘螨 1．3粉尘螨变应原 (D．pteronyssinus)、家食甜螨(Glycyphagusdomesticus)、隆头食 按照WHO(1984)标准NIBSC82／518自制¨J：①采集活 lactis)和谷跗线螨 甜螨(G．ornatus)、甜果螨(Carpoglyphus 螨：面粉厂地脚粉，直接镜检初分饲养(环境温度25。C±1oC， (Tarsonemusgranaries)。 相对湿度70％±5％)；②制成千螨：取活粉尘螨，经3次丙酮2．2 ABC—ELISA法检测结果 脱脂30ra