小鼠超高硫角蛋白基因启动子的分子克隆及序列分析.pdfVIP

第23卷第4期 科技通报 V01．23No．4 BULLEllNOF AND 2007年7月 SCIENCETECHNOLOGY July．2007 小鼠超高硫角蛋白基因启动子的 分子克隆及序列分析 郭旭东，侯冬霞，毛舒燕，旭日干 (内蒙古大学 哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室，呼和浩特010021) 摘要：根据小鼠超高硫角蛋白(UHS)基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物，以小鼠全血提 取的总DNA为模板，PCR扩增出688 bp的特异性片段，连接到pMDl9T载体中获得该片段克隆 7端的调控区序列。序 plgTU。经过快速提取质粒法筛选、限制性内切酶分析证明该克隆就是UHS基因5 列分析结果也表明该克隆片段与原基因调控序列相比具有很高的一致性。研究结果为今后制备转基因 克隆动物、在毛囊细胞中特异性表达绒毛生长调控基因奠定了基础。 关键词：小鼠超高硫角蛋白基因：调控区；PCR；序列分析 中图分类号：Q781 文献标识码：A 文章编号：1001-7119{2007)04--0479-04 Molecularand ofMurine CloningSequenceAnalysis Ultra SulfurKeratinGenePromoter High GUO 0 Xu-dong,HOUDong-xia,MAShu-yan,BOUShorgan forMammalian and of (The Laboratory Education， Key ReproductiveBiologyBiotechnology，Ministry Hohhot 010021，China) PCR to of sul- Abstract：Two were and murineultra specificprimersdesignedsynthesizedaccordingthe$equenc．e hiish fur fromGenBank．Thesizeof ofUHS wag PCRfrommouse keratin(UHS)gene 688bp promotersequenceamplifiedby totalDNAwhichWas fromwholeblood the was intoEcoRVof prepared sample，andfragmentintegrated sitepMDl9-T vector．Afterthe ofclone was withthe resultshowedthatthe sequence plgTUcomparedgenomicDNA，the sequence of