HGR13与SMARCB1蛋白的相互作用及其在细胞周期中的功能鉴定.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………l 英文摘要………………………………………………………………………4 能鉴定 前言………………………………………………………………………66日U吾……………………………………………………………………… 材料与方法………………………………………………………………6 结果………………………………………………………………………20 附图………………………………………………………………………22 附表………………………………………………………………………26 讨论………………………………………………………………………27 结论………………………………………………………………………29 参考文献…………………………………………………………………29 综述…………………………………………………………………………31 致谢…………………………………………………………………………35 个人简历……………………………………………………………………36 中文摘要 HGRl3与SMARCBl蛋白的相互作用及其在细胞 周期中的功能鉴定 摘 要 证HGRl3和SMARCB1的相互作用的真实性以及两者相互作用的结构 域；根据SMARCBl的功能，探究HGRl3的功能(细胞周期)。 为了阐述该课题实验目的，特介绍以下为相关背景：在哺乳动物细胞 核内，DNA围绕着组蛋白8聚体形成一个核小体结构。这个核小体结构 成为许多跟DNA有关的生物过程的障碍，比如转录和DNA复制，以及 DNA修复。核小体结构主要有两类调控者，一类是组蛋白乙酰化／去乙酰 乙酰化，去乙酰化修饰…这一过程至今尚不完全清楚，比较明确的是，乙 酰化，去乙酰化直接影响基因的转录。还有一种染色质重构复合体，那就 的基因在全基因组散在分布，说明SWl2／SNF2复合体调节基因活性的方 式不是打开某一区段很大的染色质结构…例如巴式小体或者染色质上的 异染部分，而是随时并且随机调节各个基因所在染色质的结构的。也就是 结构域，负责与多种转录因子相互作用。基因的表达调控是细胞内最重要 的事件，细胞内某一大分子的有无，或者量的变化，直接导致细胞的质变。 细胞因此而或增殖，或凋亡，或分化，或脱分化，或休眠，或活跃。 在上世纪90年代，大规模cDNA文库测序大大推动了基因研究。人 22号染色体的q臂，也就是x染色体短臂上，它在脑中表达很高，所以 中文摘要 后来被命名为Brain X—linked expressed protein，再后来的研究中，发现这 个蛋白跟HGR74是同源蛋白。HGR的命名源于一人生长因子受体相关蛋 白，但实际上，韩春雨等人研究发现，这个蛋白跟人HGR74的功能相去 的相互作用蛋白是生长因素受体，而HGRl3主要的相互作用蛋白是转录 乎主要是转录调节。但根据命名原则，定名为HGRl3。13主要是指这个 蛋白大约13KD。 13kDa。此蛋白在人的脑和睾丸中有很高的表达，在其他器官，如肺，肾 等部位，也有少量表达。从目前的数据库来看，HGRl3不存在明显的功 能性结构域，C端具有一个富含亮氨酸的出核信号。我们对HGRl3进行 的亲疏水性分析表明，该蛋白没有大段的疏水区段，所以不可能是膜蛋白。 细胞核，40％的可能性定位于细胞浆。没有其他细胞器的定位可能性。因 此，我们推测，这个蛋白可能是一个位于细胞核的小分子，根据其亚细胞 定位我们推测，HGRl3蛋白可能和基因的表达调控有关。 用的蛋白，以期探究HGRl3分子的功能。本研究发现，表观遗传相关蛋 白SMARCBl是HGRl3的相互作用蛋白。 方法：酵母双杂交筛选与HGRl3的相互作用蛋白；体外GST Pull—down以及亚细胞定位分析实验验证其相互作用的真实性；细胞流式 分析这一相互作用对细胞周期的影响。 ， 结果：本文以HGRl3为“诱饵”蛋白，应用酵母双杂交系统筛选HGRl3 的相互作用蛋白。我们的研究发现， 相互作用。