Filamin+A调控EGFR活化对三阴乳腺癌细胞生物学行为的影响.pdf

目录 删 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………6 研究论文FilaminA调控EGFR活化对三阴乳腺癌细胞生物学行为的 影响 前言…………………………………………………………………12翮吞…………………………………………………………………12 材料与方法…………………………………………………………13 结果…………………………………………………………………30 附图…………………………………………………………………32 附表…………………………………………………………………39 讨论…………………………………………………………………43 结论…………………………………………………………………48 参考文献……………………………………………………………49 综述乳腺癌分子靶向治疗进展…………………………………．．‘…．．52 致谢………………………………………………………………………62 个人简历…………………………………………………………………63 中文摘要 Filamin A调控EGFR活化对三阴乳腺癌细胞生物学行为的影响 摘 要 目的： 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，因其发病率、死亡率高，严重危害 breast cancer，TNBC)是指雌激素受体(estrogen 体(progesteronereceptor，PR)和人表皮生长因子受体．2(humanepidermal factor growth 一种类型，约占所有乳腺癌的20％，多见于年轻女性患者，肿瘤恶性程度 高，易出现局部或远处淋巴结转移，预后最差。随着分子生物学时代的到 来，TNBC同样作为一种异质性群体存在，根据基因表达谱的分析，其中 一小部分TNBC属于乳腺癌分子分型中的正常乳腺样型，此型乳腺癌 治疗，已成为乳腺癌治疗的重点和难点。针对这一严峻形势，进一步探索 TNBC发病机制，寻找有效的乳腺癌治疗方法势在必行。 factor 表皮生长因子受体(epidermalgrowth kinase，RTK)家族，包括四大成员： 体酪氨酸激酶(receptortyrosine 腺癌关系最为密切的一类生长因子受体。表皮生长因子受体通过与配体 (如EGF)结合形成同源或异源二聚体，进一步激活多条信号转导通路， 成作用。其中EGFR是此家族中最重要的成员。研究报道，EGFR是一种 与乳腺癌进展和预后不良相关的标志性分子。35％．50％的乳腺癌中EGFR 呈高表达，特别是三阴乳腺癌患者普遍伴有EGFR过表达。因此，在EGFR 过表达的TNBC中，EGFR将成为一个很有吸引力的治疗靶点。目前针对 EGFR的分子靶向药物如西妥昔单抗等已应用于乳腺癌的临床治疗，但其 单独应用有效率不高且伴有耐药问题，提示在EGFR过表达的乳腺癌中可 能还有其它的分子影响EGFR信号通路活化，在乳腺癌的发病中发挥重要 中文摘要 作用。 细丝蛋白A(Filamin 合蛋白。在细胞浆内广泛分布，也可跨膜或于细胞核内存在。FLNa是“V 形的同型二聚体，由肌动蛋白结合区、24个重复13．折叠片层结构以及两 个绞链区组成。FLNa的特殊结构决定其具有强大的功能：其分子可交联 肌动蛋白丝形成稳定的细胞骨架，并与多种细胞膜蛋白结合，影响如 粘附、迁移和侵袭等行为。Zhu等认为FLNa可以调控入黑色素瘤细胞 、．‘￡I 逼。 本研究拟通过：(1)采用质粒转染技术，建立沉默FLNa的三阴乳腺 验、Transwell法以及明胶酶谱法检测稳定转染细胞株的增殖、迁移和侵 袭能力；(3)采用Western blot法，检测EGFR及其下游信号通路中各激 其下游信号分子的作用机制，为更有效治疗TNBC提供新靶点。 方法： 1质粒转染技术建立沉默FLNa的稳