细菌hoksok解离后致死系统研究进展.pdfVIP

第33卷第2期 中国预防兽医学报 V01．33．No．2 2011年2月 ChmeseJournalofPreventive Medicine Feb．20ll Veterinary 1．02．22 doi：10．3969／j．issn．1008—0589．201 细菌hok／sok解离后致死系统研究进展 蒋志伟博，康小燕博，郁磊，朱国强’ (扬州大学兽医学院，江苏扬州225009) 中图分类号：$852．9 文献标识码：B 1)02—0166—03 文章编号：1008．0589(201 由于编码特定基因的重组质粒增加了细胞本身的代 的翻译。由于hok蛋白的表达依赖于mok蛋白的调节作 谢负担，因此，含有质粒的重组菌通常不稳定。质粒不 用，因此sok 稳定性(Plasnid 的抑制hok蛋白的表达171。sokRNA含有一段强启动子序 instability)，包括分离不稳定性(Segregational 列，但不稳定。易降解(半衰期为30S)；而hokmRNA基 instability)和结构不稳定性(Structuralinstability)两个方面， 其中质粒的分离不稳定性是质粒不稳定性的主要因素。 因虽然含有弱启动子序列，但非常稳定(半衰期为20min)t8j。 一旦丢失外源质粒，细胞将迅速增长，在数量上很快超 全长hokmRNA(FLhok mRNA)在体内主要以无活性的形 过重组菌。因此，质粒稳定性是重组细菌研究与应用中 式存在，即不能与核糖体或sokRNA结合。其5’端tac 备受关注的曲J题。质粒的稳定存在依赖于外界一定的选 是翻译激活区域，与3’端蹦互补，是维持hokmRNA完 mRNA3’ 择压力，目前常用的有以抗生素作为选择压力及抗性基 整结构的必要条件。当核酸外切酶作用于FLhok 因作为选择标志的质粒载体系统和以营养选择标志基因 端fbi时，使其发生结构重排，5’端tac序列被释放出来， 代替抗性基因的染色体．质粒平衡致死系统，但这两种 tac．ucb序列发生巨补结合，形成新的茎．环结构。sok 质粒载体系统都有其局限性。因此，近年来报道了一种 RNA的5’末端单链“尾巴”能够特异性识别hokmRNA 更为安全有效的新型质粒稳定系统．质粒解离后致死 上的茎．环结构，并与之结合，形成一种RNA复合体， 但随即又被核糖核酸酶降解IS-Ol。在含有质粒的细胞中， (Post．簿egationalkillingsystem，PSK)系统…。该质粒PSK sok 系统又称为毒素．抗毒素系统(toxin-antitoxinRNA与激活的hokmRNA结合，从而阻断的hok system， mRNA与核糖体的结合，抑制hok蛋白的表达；而在无 TAS)，其中以ho剧sok基因为标志的质粒PSK系统研究 较为广泛12-q。 质粒的细胞中．由于sokRNA很快被降解，hok毒