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第 26卷 第 4 期 华南农业大学学报 Vol. 26, No. 4
2005年 10月 Journal of Sou th Ch ina A gricu ltural U n iversity O ct. 2005
转基因耐除草剂大豆及产品中外源
成分检测方法的建立
1 1 2 1 1 1 1
姚 涓 , 赵均良 , 陈金顶 , 穆 虹 , 周 峰 , 姜大刚 , 梅曼彤
( 1华南农业大学 生命科学学院 ,广东 广州 510642; 2 华南农业大学 兽医学院 , 广东 广州 510642)
摘要 :分别从 DNA 和蛋白质 2个水平上对转基因耐除草剂大豆及其产品的检测方法进行了研究. 设计合成引物检
( )
测大豆内参照基因 L ectin 大豆凝集素 及转基 因抗除草剂 Roundup R eady 大豆外源基 因 , 包括来 自土壤细菌
(
A g robacterium tum ef aciens株系 CP4 的 5烯醇丙酮酸莽草酸 3磷酸合酶 5eno lp yruvylsh ik im ate3pho sphate syntha se,
) ( ) (
EPSPS 基因、花椰菜花叶病毒 Cau liflower mo saic viru s, CaMV 35S 启动子 、胭脂碱合酶 3 端′的转录终止子 nop aline
syntha se,N OS ) . 应用优化的常规 PCR 方法 ,对大豆及其加工产品进行了检测 ,检测灵敏度可达 01%. 通过 PCR
方法从转基因大豆中扩增出 CP4EPS PS 基因 ,在大肠杆菌中表达 ,利用表达的外源蛋白质作为抗原免疫家兔 ,得到
( )
该蛋白质的多克隆抗体 ,并建立了一套基于蛋白质印迹杂交 western hybridization 的检测转基因大豆及其粗加工
品的方法 ,其检测极限达到 1%以下. 此两方法互相配合 ,互相印证 ,有助于规范化转基因检测方法的建立.
关键词 :转基因耐除草剂大豆 ; 大豆加工产品; 定性 PCR; 外源蛋白质检测
中图分类号 : Q55 文献标识码 : A 文章编号 :
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