低强度脉冲超声波对大鼠脂肪干细胞增殖及成骨分化的影响.pdfVIP

·408· ．基础研究． 低强度脉冲超声波对大鼠脂肪干细胞增殖 及成骨分化的影响 江浮 郭风劲 许涛 杨克勤 【摘要】 目的探讨低强度脉冲超声波(LIPus)对体外分离培养的大鼠脂肪源干细胞(ADscs)增殖 及成骨分化的影响。方法取4周龄sprague·Dawley大鼠腹股沟处脂肪组织，分离出脂肪干细胞并体外培养， 经免疫磁珠分选、流式细胞仪鉴定ADscs表面标志后，取第3代ADscs，经LIPus作用不同时间后，采用流式 细胞仪检测细胞周期，计算细胞增殖指数，采用ccK一8法比较细胞增殖活性。取第3代ADsCs，设置阴性对 照组、LIPus组、成骨诱导组及LIPus联合成骨诱导组，于LIPus作用7d、14d时测定各组细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性；于LIPus作用21d时采用Vonkossa染色比较各组细胞成骨分化能力。结果第3代ADscs高 表达cD29、cD44，低表达cD34，符合ADscs表面标志物特征；LIPus组细胞增殖指数较对照组明显提高，细 胞增殖加快。与阴性对照组比较，LIPus组于实验进行7d、14d后ALP活性明显升高；LIPuS作用能促进 ADscs致矿化结节形成，但其矿化结节数量不及LIPus联合成骨诱导组。结论LIPus能加速ADscs增殖， 促进ADscs向成骨细胞分化。 【关键词】 低强度脉冲超声波；大鼠；脂肪源干细胞； 增殖；成骨分化 TheeffectsOf10w ultrasoundonthe and diffbreⅡtiatioⅡOfrat inteⅡsitypulsed proHferatiOnosteogenic adipOse tissue-deriVedstem cells朋IⅣG n昭+，GUOn增珂ng，盖u死o，yAⅣG‰一gi增．+Deponment矿0n^oped协， z’o，l蜀面舶点Pi￡口z，z’D，lg面讹dicozcDzzeg它，月k口z^o，喀’‰如e，苫i秒矿．scie，lce口nd?乙c，lnoZog)，，I阢^口乃43DD3D，c，lin口 CorMpondi增ⅡⅡmor：XU％o，Em口以：yh眦口D@2甜．Mf To the efkctsoflow 【Abstract】objectiVeinvestigatebiological intensitypulsedultrasound(LIPus)on the and diH．erentiationof tissue-de“vedstem 汛移讧rD． Methods proliferationosteogenic adipose cells(ADSCs) ADSCswereharvestedf如mthe fat of4一week—oldfemale Primary inguinalpads SpragIle-Dawleyrats，cultured；n口i￡ro and cell SurfaceADSCmarkerswereidentifiedflow LIPUSat purifiedbymagnetic-actiVatedsoning． by cytometry． 100mW／cm2wasusedtostimulatetheculturedcell8．Flow was for Cellular cytometryperfo瑚edce儿cycleanalysis． wasevaluatedviaCCK8 a indexwascalculated． chromatometry，and ADSCswere proliferation proliferation assig