A型口蹄疫病毒型特异性抗原的可溶性原核表达及多克隆抗体的制备.pdf

中国人兽共患病学报 2010，26(9) 82l Chinese ofZoonoses Journal 文章编号：1002—2694(2010)09—0821—04 A型口蹄疫病毒型特异性抗原的可溶性原核 表达及多克隆抗体的制备* 高闪电，常惠芸。独军政，丛国正，邵军军，林 彤 摘 要：目的 可溶性表达A型口蹄疫病毒型特异性结构蛋白VPl．制备型特异性的兔抗A型FMDVVPl多克隆抗体。 方法 性表达的VPl融合蛋白进行纯化。然后用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体。以EI，ISA、Westernblot和间 blot Mr约为33000的VPl融合蛋白．与预期结果相符。目的蛋白纯化后，在电泳图片上显示较为清晰的单一条带。Western 分析结果显示，VPl蛋白可与豚鼠抗A型口蹄疫病毒阳性血清反应。用纯化VPl蛋白免疫新西兰大耳白兔制备的多克隆抗 体效价达l：12800以上，具有较高的型特异性。并且可与同型FMDV细胞培养物中的病毒抗原发生反应。结论制备了具 基础。 关键词：A型口蹄疫病毒；结构蛋白VPl；原核表达；可溶性；OrapT信号肽 中图分类号：R392．11文献标识码：A Soluble ofthe ofFMDV expressiontype-specificantigen of Aand ofits serotypepreparationpolyclonalantibody GAOShan-dian，CHANG Hui—yun，DUJun—zheng，CONGGuo—zheng，SHAOJun-jun，LIN Tong Animal (KeyLaboratoryof VirologyofMinistryofAgriculture，StateKey FMD LaboratoryoJVeterinaryEtiologicalBiology，NationalReferenceLaboratory， Lanzhou Research Sciences。Lanzhou Institute，ChineseofAgricultural 730046，China) Veterinary Academy ABS一1 solublerecombinant offoot—and—mouthdiseasevirusof Aand RACT：Toexpress type-specificantigen serotypepre— thatof recombinantvector wasusedas forPCRto parepolyclonalantibodytypespecificity．the cloningpGEM—AVPl template the ofVPl，andthe of wasaddedtOthe ofVPl，thent