嵌合型PCV1-2灭活疫苗对商品猪免疫保护力研究和嵌合型PCV1-2活疫苗中间试验.pdf

l 刘旭杰：嵌合型PCVI．2灭活疫苗对商品猪的免疫保护力的研究和嵌合型PCVI．2活疫苗的中间试验 嵌合型PCVl．2灭活疫苗对商品猪的免疫保护力 研究和嵌合型PCVl．2活疫苗的中间试验 研究生：刘旭杰 专业：预防兽医学 导师：高崧教授 刘秀梵教授 摘 要 circovirus 猪圈环病毒2型(porcine2，PCV2)与猪群中发生的多种传染病相 关，它已被证明是引起断奶仔猪多系统衰弱综合征(postweaningmultisystemie wasting 一些疾病相关，例如，猪皮炎肾炎综合症，猪呼吸道疾病综合症，这些疾病现统 称为猪圆环病毒病。 该病的主要临床症状是消瘦、呼吸困难、淋巴结肿大、皮肤苍白及黄疸。 本研究旨在用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒PCVl．2灭活病毒作为免疫原 免疫PCV2低母源抗体商品猪，再对免疫猪进行PCV2攻毒，对免疫后攻毒的试验猪 的各项指标进行测定，以评价该候选疫苗用于预防PCV2感染的有效性。同时，以 嵌合型猪圆环病毒PCVl．2灭活疫苗及其活疫苗进行中间试验，以评价其在猪场条 件下对商品猪的免疫保护效果。 1．嵌合型PCVl-2灭活病毒对低母源抗体商品猪的免疫保护效力的研 究 刘旭杰：嵌合型PCVI．2灭活疫苗对商品猪的免疫保护力的研究和嵌台型PCVI．2活疫苗的中闻试验2 应用本实验室构建的嵌合型猪圆环病毒PCVl．2灭活疫苗为免疫原对42日龄 的母源抗体效价1：lO以下的商品猪进行免疫，在一免后14天进行第二次免疫， 在第二次免疫后2l天以PCV2野毒进行攻毒。 试验结果表明，在二免后21天，所有免疫组的试验猪都表现出血清学的阳转 变化，并可以检测到针对PCV2的较高效价的荧光抗体和中和抗体。在攻毒后21 天剖检，攻毒对照猪的淋巴结和肺脏的大体和显微病变都比免疫组猪严重。同时， 免疫组猪支气管淋巴结和血清中PCV2病毒的载量显著低于攻毒对照组猪(尸 0．05)。综上所述，嵌合型猪圆环病毒PCVl-2灭活疫苗可以有效地诱导免疫猪 产生对PCV2感染的保护性免疫应答。 2．嵌合型PCVl—2灭活疫苗的中间试验 根据农业部《农业转基因生物安全评价管理办法》要求，进行嵌合型PCVl．2 灭活疫苗在江苏省的中间试验。对免疫组的10头10日龄商品猪进行肌肉注射免 疫，用间接免疫荧光试验(indirectimmunofluoreseent assay，IFA)定期检测猪血清 中抗体产生的情况，同时检测免疫猪的嵌合型PCVl．2病毒的排毒情况及其对试验 场所附近非靶动物的影响和致病性等。试验结果表明，在免疫PCVl．2灭活疫苗后， 试验猪产生明显的体液免疫应答，利用IFA方法检测到试验猪的血清中产生了较 高效价的针对PCV2的荧光抗体。同时，PCVl．2灭活疫苗对试验猪的增重无明显 影响，对非靶动物没有任何致病性以及其他方面的影响。 3．嵌合型PCVl．2活疫苗的中间试验 根根据农业部《农业转基因生物安全评价管理办法》要求，进行嵌合型PCVl．2 活疫苗在江苏省的中间试验。对免疫组的lO头10日龄商品猪进行肌肉注射免疫， immunofluoreseent 用间接免疫荧光试验(indirect assay，IFA)方法定期检测猪血清 中抗体产生的情况，同时检测免疫猪的嵌合型PCVl．2病毒的排毒情况及其对试验 场所附近非靶动物的影响和致病性等。试验结果表明，在免疫PCVl．2活病毒后， 试验猪产生明显的体液免疫应答，利用IFA方法检测到试验猪的血清中产生了较 高效价的针对PCV2的荧光抗体。同时，PCVI．2活疫苗对试验猪的增重无明显影 刘旭杰：嵌合型PCWI．2灭活疫苗对商品猪的免疫保护力的研究和嵌台型p(Ⅳ卜2活疫苗的中间试验3 响，对