大黄素对人鼻咽癌裸鼠移植瘤的放射增敏作用.pdfVIP

第九届中南地区实验动物科技交流会论文汇编 动物实验研究  细胞。无菌条件下在裸小鼠右后肢外侧皮下接种 CNE­1细胞 0.1ml （悬液），待瘤块最大径 长至（6±0.3mm）时随机分组进行实验。  1.2.3  实验分组 将 42 只荷瘤鼠随机分为 7 组，每组 5～6 只：空白对照组、溶媒组、单 纯药物组、单纯照射组、大黄素联合放射治疗组 （联合治疗组）。其中单纯药物组和联合治 疗组按药物高低剂量各分为 2 个亚组。空白对照组不进行药物和放射治疗，仅腹腔注射生 理盐水；单纯药物组按高低剂量给与大黄素（12mg/kg 和 4mg/kg），腹腔注射，1 次/12h， 60  连用 5 次；溶媒组经腹腔注射 pH 8.8 的 NaOH 溶液；单纯照射组进行单次局部 6Gy  CO  射线照射；联合治疗组先按高低剂量给与大黄素（12mg/kg 和 4mg/kg）后再进行单次局部  60  6Gy  C 射线照射，药物注射方式同单纯药物组。  O  ­1  1.2.4  照射方法 照射野只含整个裸鼠荷瘤后肢， 源皮距为60cm， 剂量率为325.4cGy.min  。 照射前使用乙醚，使动物进入轻度麻醉状态。每次照射 1只裸鼠。  1.2.5  肿瘤生长评价 分组处理后，隔日由专人用游标卡尺测量移植瘤的最大径（mm）。 当各组肿瘤的最大径增长至 2 倍时为实验终止点。计算肿瘤的生长延缓时间：绝对肿瘤生 长延缓时间（AGD，absolute growth delay )=TR－TC( TR 为单纯照射组裸鼠瘤块最大径增 长 2倍天数，T C 为对照组裸鼠瘤块最大径增长 2倍天数)。 标准化肿瘤生长延缓时间(NGD，  normalized growth  delay)=TL－TG(TL 为联合治疗组裸鼠瘤块最大径增长 2 倍的天数，TG  为单纯药物组裸鼠瘤块最大径增长 2 倍的天数)；增敏系数(EF)=NGD ／AGD，  EF1 提示 [5]  有放射增敏效应  。  1.2.6  病理检查 当各组瘤块的最大径增长至原来的 2倍时为实验终止点， 处死所有裸鼠， 获取肿瘤标本，放入  10％中性福尔马林溶液内固定  24h  后常规石蜡包埋，连续切片，行  HE 染色，光镜下观察移植瘤病理形态，计算核分裂率。  1.3  统计方法 采用 SPSS13.0统计软件绘制肿瘤生长曲线，统计方法采用方差分析。P＜  0.05 为差异有统计学意义。  2  结果  2.1  移植瘤生长及裸鼠一般情况 裸鼠右后肢皮下接种 CNE­1细胞，3d后肉眼可见局部肿瘤生长，经过 10d，瘤块最大 径为（8 ± 2.24）mm （x ± s，n=6）。实验期间，各组动物进食、活动、排便以及其他一般 状况未见明显异常。  2.2  大黄素联合放射对移植瘤生长的影响 表 1 显示各组移植瘤平均最大径倍增的时间，可以看出对照组、溶媒组和大黄素组组 间无显著差异（P＞0.05）；单纯照射组肿瘤生长受到一定程度的抑制，和对照组相比，肿 瘤生长延缓时间为  4.28d，差异有统计学意义（P＜0.05）；12mg/kg  大黄素联合照射组和  4mg/kg  大黄素联合照射组的肿瘤生长明显受到抑制，肿瘤生长延缓时间分别为  6.9d  和 491  第九届中南地区实验动物科技交流会论文汇编 动物实验研究  6.77d，和对照组相比具有统计学差异（P＜0.05），增敏系数（EF）分别为 1.612和 1.601。 以每组隔天移植瘤最大径的均数绘制移植瘤生长曲线，可见 12mg/kg  大黄素联合照射组和  4mg/kg  大黄素联合照射组与对照组、单纯照射组及单纯大黄素组相比，能明显延缓移植瘤 的生长（P＜0.05），见图 1、2。 表 1 各组移植瘤平均最大径倍增时间和生长延缓时间（d）