几种方法对非禽源生物制品中外源病毒检测与研究.pdfVIP

1 11111111111Ull UIII |111111 Y2697710 几种方法检测非禽源生物制品中外源病毒的研究 摘要 《2010版中华人民共和国兽药典》规定非禽源外源病毒检验中，选择细胞培养被检 样品14日后要用致细胞病变检测、红细胞吸附检测、荧光抗体检测三种方法检测样品 中是否污染外源病毒，如检验中出现细胞病变、红细胞吸附、特异性荧光任意一种现象 则判该产品有外源病毒污染，不合格。本实验是为了提高实验的准确度及在判断出产品 不合格的基础上进一步明确被污染病毒的种类，从而有目的的防治外源病毒污染而做的 研究。 致细胞病变(CPE)实验中，我们用6种生产细胞接种8种生产或检验所需的病毒 后进行培养和观察，结果出现CPE判断产品不合格(药典规定)后，还能确定：在Vero 可确定病毒种类。 红细胞吸附实验是对红细胞产生吸附作用的病毒进行的检测。我们选择5种病毒分 别接种4种细胞，挑选出病毒易感细胞。结果为在PKl5细胞上有红细胞吸附作用的是 CPIV。这样，可以确定引起红细胞病变的病毒种类。 荧光抗体检测法是通过荧光的方法用已知抗体检测样品中是否含有对应抗原的检 测阳3。市面上购买的荧光一抗、二抗规定的稀释比例中，一些比例观察荧光时往往无荧 光或荧光效果差。本实验对细胞浓度、一抗浓度、二抗浓度对荧光效果的影响做比较， 时观察效果最佳。可制备最优的荧光片，更好的观察实验结果。 关键词： 外源病毒检测； 致细胞病变； 红细胞吸附； 荧光染色 万方数据 i an fordetecti non—aV onseveraI methods Research ng I of Vi rus bi 0I i caproductsexogenous og Abstract ofthe of 10 formulatedinthe China(20Edition)was VeterinaryPharmacopoeiaPeople’SRepublic are donewiththree e腋ct ofnon．avian virus．Tests methods：cytopathic testing exogenous normally whetherare testandfluorescencedetection，toconfirm they polluted detection，hemadsorptionantibody theselectedcellculturefor14 virusafter hasbeencultured byexogen