海水中铁载体的固相萃取预处理和高效液相色谱-串联质谱测定.pdfVIP

第43卷 分析化学 (FENXI HUAXUE) 特约来稿 第9期 2015年9月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 1285~1290 DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.150369 海水中铁载体的固相萃取预处理和高效液相色谱-串联质谱测定 * 章 蕾 袁东星 方 锴 刘宝敏 (厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门大学环境与生态学院,厦门361102) 摘 要 铁载体是一种由海洋菌类合成并分泌、能特异性络合海水中铁的有机配体。 本研究建立了固相萃取 预处理、高效液相色谱-串联质谱测定海水中铁载体化合物的分析方法。 海水样品经0.22 μm滤膜过滤,其中铁 载体由ENVI-18萃取柱萃取、甲醇洗脱后得到富集净化后的试样;采用SB-C18反向色谱柱以0.1％(V/ V)甲酸 溶液和甲醇溶液梯度洗脱分离,在质谱的多反应监测正离子模式下检测。 3种铁载体化合物标准物质Pyover- dines-Fe,Ferrichrome,Ferrioxamine E 的检测线性范围分别为0.001 ~3.0 μg/ mL,0.005 ~ 15.0 μg/ mL, 2 0.001~3.0 μg/ mL,相关系数R 0.99;仪器检出限分别为0.08,1.76 和1.36 ng/ mL;定量限分别0.27,5.87 和4.53 ng/ mL。 在海水样品中添加铁载体化合物混合标准溶液,3种目标物测定值的相对标准偏差12％,方法 回收率分别为Pyoverdines-Fe 12.1％ ~18.6％,Ferrichrome82.0％ ~97.7％,Ferrioxamine E70.0％ ~98.3％。 关键词 铁载体;固相萃取;高效液相色谱-串联质谱;海水 1 引 言 不同于地表水,海洋表层的生物可利用态铁(Fe)浓度极低,仅为nmol/ L。 铁载体是一种低分子量 [1] (0.5~1.5 kDa)的有机配体 ,对铁有极强的螯合能力。 在铁限制条件下,铁载体由海洋中的一些细 菌和真菌合成并分泌到细胞外,与海水中的铁特异性结合,通过细胞膜上特定铁载体受体的识别和转 运,有效地将铁运输到微生物细胞内,满足生物体对铁的需求[1~3]。 铁载体种类繁多,根据其官能团的 不同,可分为氧肟酸型、酚-儿茶酚型和少量柠檬酸型。 铁载体是海洋生物量的重要影响因子,其定性定 量分析数据的获取是相关研究的关键。 由于铁载体结构复杂多样,在海洋环境中浓度低[4~6] ,分析相对困难,一般需要采集大量水样进行 萃取和富集。 传统的前处理方法,如液-液萃取法、柱层析法等[6~8] ,存在着操作繁琐、重现性较差等缺 [9,10] 点;而固相萃取法用于铁载体萃取 具有重现性好、溶剂用量小、操作高效快速等优点。 测定铁载体 [11] 常用分光光度法,如 CAS(Chrome azurol S test)法 用于大多数细菌和真菌分泌的铁载体的检测。 [12] [13] Csáky等 特异性检测了氧肟酸型铁载体;Arnow 建立了测定酚-儿茶酚型铁载体的方法 。 上述方 [1] [14] 法易受基底干扰 ,回收率差,灵敏度低。 Kilz 等 尝试使用高效液相色谱-电喷雾离子源-质谱法 (