丝素蛋白在甲醇一水混合溶剂中构象变化的光谱学研究.pdfVIP

第3O卷 ，第 11期 光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vo1．30，No．11，pp3047—3051 2010年 11月 Spectroscopy andSpectralAnalysis November，2010 丝素蛋 白在 甲醇一水混合溶剂中构象变化的光谱学研究 马 林 ，何维仁，黄爱民，李立硕，童张法，韦俏娜，黄子伦 广西大学化学化工学院，广西南宁 530004 摘 要 应用圆二色谱、内源荧光和外源荧光探针研究了丝素蛋 白在甲醇一水混合溶剂中的构象变化及机 理。结果显示，在浓度低于3O％(V／V)的甲醇一水混合溶剂中，处于无规卷曲状态的丝素蛋 白可以通过疏水 相互作用形成小的疏水区域，随着甲醇浓度的增加，丝素蛋白发生由无规卷曲向 折叠的构象转变 ，削弱了 疏水侧链的相互作用。分析表明，丝素蛋白的构象变化与溶剂体系的微观结构密切相关，其稳定性主要由肽 键单元与混合溶剂中的分子簇之间的相互作用决定 。低浓度的甲醇一水混合溶剂保持水固有的氢键结构 ， 对丝素蛋白肽键单元的溶剂化和丝素蛋白构象的影响较小 ，而随着甲醇浓度的增加，溶剂结构出现由四面 体结构的水分子簇向链状结构的甲醇分子簇的转变，丝素蛋白通过形成分子内氢键减少肽键单元与溶剂分 子的接触，从而引发丝素蛋白的构象转变。 关键词 丝素蛋白；甲醇；构象变化；荧光光谱；圆二色谱 中图分类号：0657．3 文献标识码 ：A DOI：10．3964／j．issn2010)II一3047—05 近年来，国内外对丝素蛋白生物材料的制备和应用得到 引 言 了很大发展，制备结构和性能可调控的丝素蛋白材料以适应 实际应用的需要已经逐步成为科研工作者的工作重点。利用 蚕丝是最早被利用的天然蛋白质之一，由于其组成、结 甲醇诱导丝素蛋白产生由无规卷曲向 折叠的转变是丝素蛋 构和成纤机理赋予它天生的各种优 良的纤维秉性而享有 “纤 白材料制备中最普遍的方法l4．s]，但是，甲醇一水混合溶剂中 维皇后”的美誉。丝素蛋白(SF，silkfibroin)是蚕丝最主要的 丝素蛋 白构象变化的机理尚有待进一步研究。 组成部分，随着对其独特氨基酸成分、结晶结构和理化性能 本文分析了丝素蛋白在系列浓度的甲醇一水混合溶剂中 研究的深入 1_『3_，尤其是近年来蚕丝多用途开发向高新技术 的圆二色谱(CD)和发射荧光光谱。圆二色谱是研究溶液中 的渗透，国内外对丝素蛋 白的应用正从传统的纺织领域积极 生物大分子构象的重要手段 ，可以有效探测蛋白质二级结构 向生物医药、化妆品、食品等领域拓展，丝素蛋白由于其优 的变化。蛋白质内源性荧光的重要特征之一是对环境的变化 异的力学性能、生物相容性和可生物降解性而在组织工程l4] 很敏感，蛋白质的构象转变、变性、结构域的缔结 、与底物 和药物缓释材料c5等领域展现出巨大的应用前景。 结合 ，都会引起内源性荧光生色基团局部环境的改变，因此 丝素蛋 白在稀溶液中主要 以无规线团形式存在，但是对 可以为了解蛋白质的构象变化提供大量有用信息。结合外源 荧光探针8一苯胺基萘一1一磺酸镁 (ANS)的光谱分析，我们根据 于丝素蛋白而言，无规卷曲并不是热力学上稳定的结构，在 一 溶剂微观结构的变化探讨了丝素蛋白在甲醇一水混合溶剂中 定的外界条件下 (如温度、浓度、溶剂、离子作用及应力 构象转变的机理，为丝素蛋白材料的结构性能调控提供理论 等)会发生由无规卷曲向 折叠的构象变化，并伴随着丝素