脱磷脂牛血红蛋白的制备.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( *# 年 月 $%%$ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-./-01-2 $%%$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 脱磷脂牛血红蛋白的制备 赵东旭 韦新桂 谷振宇 张贵锋 苏志国 （中国科学院过程工程研究所，生化工程国家重点实验室，北京 !%%%% ） 摘 要 研究了一种新的脱磷脂血红蛋白制备方法。在 、 或 、 作共溶剂的情况下， $ D # D EF4%%% $ D # D EF!%%%% 利用疏水相互作用色谱基本上完全除去了新鲜牛血红细胞裂解液中的磷脂类成分，其中以# D EF4%%% 为共溶剂 时，血红蛋白的回收率最高，达 ，在血红蛋白存在下所用的苯基琼脂糖 型疏水介质的吸附容量为 # *% D 36G 6 *6 0H 磷脂 介质。经过疏水作用色谱后，血红蛋白的 是 ， 系数是 ，较好地保存了血红蛋白的生物 I0J E#% 556 K4E: L=)) $ *#4 活性。对疏水作用色谱的脱磷脂机理以及EF 的保护机制进行了讨论。 关键词 血红蛋白，疏水作用色谱， ，磷脂，共溶剂 EF 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） 7M5 N !%%%35%6! $%%$ %#3%6%3%# ［ ］ 以血红蛋白（ ， ）为基质的人血液 物活性成分的分离纯化领域经常用到 8 P !$ 。在 L-0(H)(1=O L1 EF 代用品的研究一直是血液代用品研究方面的重点和 利用疏水作用色谱对血红蛋白进行纯化的过程中， 难点，但是残留在血红蛋白制备物中的脂类与输注 考察EF 的保护作用同样具有重要的理论价值和 ［，］ 后的血凝现象有关! $ ，因此去除血红蛋白溶液中的 实践意义。 脂类对于以血红蛋白为基质的人血液代用品的研究 ! 材料与方法 具有重要作用。血红蛋白溶液中的磷脂类组分主要 来自于红细胞破裂过程中的膜碎片即基质组分，磷 ! ! 新鲜牛血处理及血红蛋白溶液的制备 含有抗凝剂（ 枸橼酸钠）的新鲜牛血取回 脂的释放是不可避免的。为了除去血红蛋白溶液中 % * 5D 的膜基质成分，研究人员曾采用了膜过滤技术、阴离 后，用$%%%H S 5%0=O 离心去除血浆，并在同样的离 ［ ］ 心条件下依次用 溶液和