miR-21在子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达及对P53的调节作用.pdf

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………4 作用 前言…………………………………………………………………8再Ij舌…………………………………………………………………8 材料与方法…………………………………………………………9 9 结果…………………………………………………………………1 1 附图…………………………………………………………………2 附表…………………………………………………………………24 讨论…………………………………………………………………26 结论…………………………………………………………………32 3 参考文献……………………………………………………………3 6 综述MicroRNA在子宫内膜癌发生、发展及临床诊治中的研究……3 致谢………………………………………………………………………43 个人简历…………………………………………………………………44 中文摘要 miR．21在子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达 及其对P53的调节作用 摘 要 目的：子宫内膜癌指原发于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤，以来源 于子宫内膜腺体的腺癌最常见，围绝经期及绝经后妇女多发。其作为女性 生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，发病率占女性全身恶性肿瘤的7％，女 性生殖道恶性肿瘤的20％--30％。近年国外流行病学调查发现其发病率呈 上升及年轻化趋势，但其病因及发病机制尚不明确。活检虽是目前诊断子 宫内膜癌唯一的金标准，可它却是一项侵入性检查，所以我们急需一个可 早期诊断子宫内膜癌的方法。microRNA是～类广泛存在于真核细胞中的 mRNA降解或抑制其翻译，从而调控靶基因的表达，影响细胞增殖、分化 和凋亡。miRNA可通过类似癌基因、抑癌基因或其他方式调控肿瘤的发 生、发展和转化过程。其中当属对miR一21的研究最为热门，目前研究发现 其可能参与了细胞的分化、增殖和凋亡，与肿瘤的发生密切相关。P53是 当今研究最为广泛的人类肿瘤抑制基因。P53蛋白与DNA多聚酶结合，可 使复制起始复合物失活，从而抑制肿瘤细胞过度增殖。P53突变导致该基 因过度表达，这种异常过度表达往往与子宫内膜癌临床分期、组织分级、 肌层侵蚀度密切相关。本研究旨在通过观察抑$IJmiR．21的表达后子宫内膜 的表达，并探讨二者在子宫内膜癌中的作用关系，以发现miRNA．21在子 宫内膜癌发生、发展过程中的作用，为其诊断和治疗提供新的靶标。 方法： 1培养子宫内膜癌Ishikawa细胞株。 染miR．21的特异性抑制剂反义寡核苷酸组；②阴性对照组即转染无关 miR．21的特异性抑制剂核苷酸序列组；③脂质体对照组即转染 Lipofectamine饼2000脂质体转染试剂组；④空白对照组即不转染组。 3CCK．8法检测各组子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖情况。 中文摘要 4流式细胞学方法检测各组子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡情况。 P53mRNA的表达水平。 6Western 情况。 7用SPSS13．0统计软件对所有数据进行统计学分析。数据以均数士标 准差(i士s)表示，两组间均数比较用f检验，多组间均数比较采用单因素方 差分析，P0．05为具有显著性差异。所有实验均重复3次。 结果： 聚焦显微镜观察转染效率：24h后实验组及阴性对照组孔中均有弱荧光表