散血草对裸鼠模型血管瘤生长及其Fas%2fFasL表达影响研究.pdf

目 录 1 散血草对裸鼠模型血管瘤生长及Fas/FasL 表达影响的研究 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………3 1.3 前言……………………………………………………………7 1.4 材料与方法……………………………………………………9 1.5 结果……………………………………………………………16 1.6 讨论……………………………………………………………25 1.7 结论……………………………………………………………29 1.8 参考文献………………………………………………………30 1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………34 2 致谢……………………………………………………………35 3 婴幼儿血管瘤细胞凋亡的研究进展 （综述）………………36 散血草对裸鼠模型血管瘤生长及Fas/FasL 表达影响的研究 摘 要 目的：观察散血草对裸鼠模型血管瘤生长及Fas/FasL表达的影响，探 讨散血草对血管瘤的治疗作用及其可能机制。 方法：手术切除的婴幼儿 增生期血管瘤新鲜标本，采用组织块移植法将小组织块（3mm ×4mm × 5mm ）移植于无特殊病原体级裸鼠皮下，每只皮下移植2个瘤体组织，制成 婴幼儿血管瘤裸鼠异种移植动物模型。移植30d后，在移植成功的65只裸鼠 中，随机选取5只观察瘤体生长情况并测量瘤体大小后处死，取出移植后瘤 体组织行石蜡包埋并制成切片，作初始对照。余下的60只荷瘤裸鼠随机分 为3个组，并各组测量瘤体大小，每组20只，40个瘤体：凡士林组，散血草 组和曲安奈德组。3个组分别给予不同用药措施：凡士林组在瘤体表面涂抹 凡士林和二甲基亚砜搽剂，每日一次；散血草组在瘤体表面涂抹散血草搽 剂，每日一次；曲安奈德组在瘤体内均匀注射曲安奈德注射液0.05ml(4mg/ ml) ，仅在实验开始时注射一次。三组裸鼠喂养条件相同，观察移植瘤体的 生长变化情况。用药后7d、14d、21d、28d，分别处死各组实验裸鼠5只， 取出血管瘤组织，测量瘤体大小后石蜡包埋并制成切片。将所有的切片进 行苏木精-伊红（hematoxylin-eosin, HE ）染色组织学分析，免疫组织化学 染色检测Fas 、FasL 、天冬氨酸蛋白水解酶 (cysteinyl aspartate specific proteinase ，caspase)8的表达，采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口 末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL ）法检测细胞凋亡。利用统计学软件SPSS 20.0分析实验数 1 据，以P0.05为具有统计学差异。 结果：1、用药前处死的5只裸鼠共10 个瘤体，生长良好，瘤体的体积大小与各实验裸鼠瘤体无差异（P ＞0.05 ）。 HE染色瘤体呈增生期改变。Fas 、FasL、caspase-8表达阳性指数分别为 28.56±2.43 、18.31±1.92、17.48±1.63，TUNEL法检测细胞凋亡指数6.79 ± 1.33 。2 、用药后，凡士林组裸鼠血管瘤瘤体继续生长，体积持续增大，标 本切片镜下观测血管瘤呈增生改变。散血草组、曲安奈德组血管瘤瘤体体 积与用药前相比均有减小（P0.05 ）。组织切片HE染色观察到血管减少， 瘤体萎缩、退化，血管腔闭塞、破裂，血管间纤维脂肪组织浸润。3、散血 草组用药后Fas 、FasL 、caspase-8表达阳性指数增加，以用药后7d增加最明 显，用药后7d、14d、21d，与用药前以及凡士林组和曲安奈德组相同时间 点比较有明显差异 （P0.05 ）；用药后28d，与用药前以及凡士林组和曲安 奈德组相同时间点比较无差异（P0.05 ）。曲安奈德组和凡士林组用药后 Fas 、FasL 、caspase-8表达阳性指数与用药前无明显增加（P ＞0.05 ）。4 、 用药后散血草组和曲安奈德组细胞凋亡增多，凋亡指数与用药前以及凡士 林组各时间点相比均明显增加 （P0.05 ）。 结论：1、散血草外用可以促 进裸鼠模型瘤体的消退。2 、散血草使裸鼠模型血管瘤瘤体组织Fas 、FasL、 caspase-8的表达明显增加。3、