新型毛细管液相色谱柱的研制及其相关应用.pdf

复旦文学博士论文 尘 摘要 ● 毛细管液相色谱柱是微分离分析的核心，也是毛细管分析技术的瓶颈。研究 新型、实用、专用的毛细管色谱柱，揭示其分离机制，且与相关技术相结合，始 终是毛细管微分析的首要任务。 溶胶凝胶(sol—gel)技术是色谱分析领域一种灵活多变的、简单易行的固定 相制备技术。溶胶凝胶技术与包覆型复合填料制备结合，是一个全新的交叉点。 传统包覆型复合填料制备过程中聚合物的固载化方法通常涉及自由基引发的交 联反应，这种方法不易控制，交联重现性差。探索性地采用溶胶凝胶固载化技术 将气相固定液包覆并固载在无机载体表面，制备出具有不同色谱选择性的复合型 ● 固定相，无疑有利于拓展溶胶凝胶技术的应用范围和开展相关复合型色谱柱保留 行为的研究。 溶胶凝胶技术与普通毛细管填充柱相结合，制备的细内径颗粒圆定化无塞整 体柱已在毛细管电色谱领域得到应用。在此基础上，开创性制备高性能大口径无 开裂颗粒固定化无塞整体柱，并将其应用于复杂蛋白质组学样品的固相预富集， 无论从柱制备技术还从应用范围，是一项创新性和实用性兼备的工作。 发展高通量、高峰容量、高分辨率的新型蛋白质组学技术平台已成为当务之 急。鉴于蛋白质组学样品的复杂性和现有二维液相／串级质谱体系有限的运行通 量，建立一个新型的和实用性极强的蛋白质组学分析技术平台，无疑对蛋白质组 学多维色谱技术的发展提供了有益的支持。 ● 本论文以溶胶凝胶技术制备毛细管色谱柱为核心，研究开发了新型实用的毛 细管色谱柱，并在此基础上开展相关研究和应用工作。制备出气相固定液包覆硅 胶复合型固定相，并与线性溶剂化相关能色谱理论相结合，研究其分离机理和色 谱行为；制备了大口径颗粒固定化型无塞整体柱，对其作为肽段预富集柱的性能 指标进行了测试和评价：搭建了蛋白质组学阵列式全多维色谱分离技术平台，将 所制备预柱应用其中，提高和拓展多维色谱分离技术的分离性能。 本论文共分五章。主要内容摘要如下： 第一章总结了毛细管色谱柱的发展概况和溶胶凝胶技术在色谱固定相制备 领域的应用及进展，同时概述了蛋白质组学多维色谱技术的发展及新型色谱柱与 之相结合的应用前景。介绍了本论文选题的目的和意义． 第二章开创性地采用溶胶凝胶法制备了气相固定液包覆硅胶复合型固定相。 详细考察研究了制备中对色谱柱性能影响的主要因素，通过优化气相固定液的用 量、溶胶凝胶前驱体的体积浓度和柱内反应时间及温度，确定了最佳包覆工艺条 件，明确了用溶胶凝胶法进行聚合物包覆无机载体的可行性。以不同极性的的芳 复旦大学博士论文 香族化合物为探针，测试评价了合成固定相的色谱性能。结果表明，所制备的复 ● 碱性化合物的分离存在一定程度的色谱峰拖尾。疏水选择性和绝对流动相灵敏度 的检测表明，该固定相具有反相固定相保留的特征。 第三章利用线性溶剂化相关能理论(LsE黜)对不同气相固定液(SE．30， 良好的化合物保留预测方程，并与碳十八键合硅胶固定相的溶质保留行为做了比