大鼠微梗死模型复制和雌激素脑血管的保护作用.pdf

中丈摘要 大鼠微梗死模型的复制和雌激素的脑血管 保护作用 摘 要 目的：在缺血性动物模型的研究·|l，投入人力物力圾 多的为全脑或局灶性缺血性动物模型，在其一|J，对大鼠大 脑中动脉阻塞(MCAO)所引发的缺血性模型研究最多，也最 成熟。但是该模型实际上是机械性人工栓塞性卒中，与人 类常见卒中发病过程存在差异。为此，我们努力寻找一种 Toshima 类似人类血栓形成过程的卒中模型。Yoshinori 等利用月桂酸钠有损伤血管内皮的作用，经大鼠颈内动脉 注入适量月桂酸钠后，引发深穿支斑管内皮受损，血小板 粘附聚集，进而血栓形成，阻塞微血管而形成微小梗死灶。 此模型的梗死发生过程与人类的血栓形成过程基本相似， 可以应用于抗血管内皮损伤，抗血小板聚集，抗炎性损伤、 溶栓和抗凝治疗的研究；亦可以用于微梗死如腔隙性脑梗 死的病生理机制的研究。其对于我们对缺血性卒中的研究 工作指导意义很大。而且，临床上具有腔隙性脑梗死的病 人并不少见，由于缺乏相应的动物模型，因此对其研究主 要限于临床。现在我们将此模型复制出来，以便应用于我 们的实验研究，并且在此模型的制作基础上，我们研究了 雌激素的脑血管保护作用。 方法：利用YoshinoriToshima等创制的经颈内动脉 注入适量月桂酸钠的方法制作大鼠微梗死模型：取雄性 Wistar大鼠40只，随机分成三组：对照组(10只)，实 中文摘要 验组(20土{)和雌二醇治疗组(10只)。实验组t{J的14 』{人鼠经腹腔注入10％水合氯醛(0．4ml／lOOg)麻孵成功 后，分别于实验第一天和第三天经颈内动脉注入lOOug月 榭?峻钠，而对j!《i纰犬鼠经J力柏j叫操作衍Jl给_j‘州等荆骨n勺 Jlitq!,ilk水，分别1i两次操作后24小时对人鼠的后续行为 学改变进行评价，并于末次行为学评价后将人鼠濉注阎 定，剥取脑组织进行病理学分析并分析病灶分布情况与大 鼠后续行为学改变之间的关系。另外6只大鼠于颈内动脉 注入月桂酸钠后2小时灌注固定，其中3只留取基底节区 脑组织，其余3只留取大脑中动脉，进行超微结构分析。 雌激素治疗组的6只雄性Wistar大鼠，在第一次注入月 桂酸钠后腹腔给于0．1mg／kg的雌激素，连续应用3天， 于第二次操作后24小时取其脑组织，病理学分析深穿支 血管的损伤情况。另外4只在应用雌激素后2小时留取脑 组织在电镜下分析其血管内皮损伤情况。 结果：在颈内动脉注入lOOug月桂酸钠后2小时，电 镜下可以见到右侧深穿支动脉内皮受损，细胞膜断裂，不 连续，并可以见到血管周围基质水肿，血管腔被挤压变形。 有的深穿支动脉内粘附有中性粒白细胞，而大脑中动脉内 皮细胞却无受损表现，但是若月桂酸钠剂量偏大(例如 150ug)，大脑中动脉亦可出现受损现象，表现为内皮细胞 膜崩解脱落，细胞核裸露。有的部位可见到星形胶质细胞 肿胀，并伴有足突水肿，核内染色质聚集、边集。偶可见 到坏死的神经元，其细胞形态结构不清，核内染色质凝集 成块状，核仁消失。有的线粒体肿胀空化，有的线粒体嵴 变得模糊，排列紊乱。第一次注入月桂酸钠后2，1小时， 中文摘要 按照Bederson的姿势反射实验检测发现具有神经功能缺 损体征的火鼠占42．9％，第二次注药后24小时再次评价， 具有神经功能缺损体征的人鼠r，J‘l-‘到85．7％。未次行为学 评价后，取脑进行病理学分析：光镜下川‘以见剑深穿支动 脉管壁增厚，管腔狭窄，有的部位有廊柃形成，导致管腔 闭塞，并伴有中性粒白细胞和单核细胞浸润血管壁，在皮 层和基底节区有微小梗死灶形成，梗死灶内亦有炎性细胞 浸润；光镜下可见微梗死灶主要分布于大脑中动脉供血区 范围内，而基底节区的病灶多于皮层上的病灶。应用雌激 素组可以见到深穿支动脉损伤较轻，动脉血管壁没有明显 增厚，血管周围炎性细胞浸润亦明显减轻。 结论：此微梗死模型是一个新型的脑梗死模型，其梗 死发生过程表现为选择性深穿支动脉内皮细胞受损，引发 血小板粘附、聚集，纤维蛋白沉积，进而微血栓形成，阻 塞血管，微梗死灶形成；另外，还继发了炎性细胞浸润， 血管壁增厚等。