八种黄酮类活性成分和血红蛋白相互作用的光谱学的研究及其Fe2%2b和VitaminC的影响.pdf

中文摘要 八种黄酮类活性成分与血红蛋白相互作用的光谱学研究及Fe2+ 和VitaminC的影响 摘 要 结构分别具有两条0t链和两条13链，为四聚体。每个亚单位由一条肽链 及一分子血红素组成。Hb在哺乳动物体内的主要功能为运输氧气和二氧 化碳，以及调节血液pH值【l】。除此之外，能与许多内源性、外源性物质 发生相互结合。黄酮类小分子普遍具有抗菌、抗病毒、抗氧化等生物活性， 是人们广泛研究的生药活性成分。黄酮类物质在体内一般难于吸收，而且 在体内很快进入II相反应(结合反应)，变为极性大、亲水性的结合型药 物，因此，其自身原型药物在体内的循环浓度是极低的【21。有报道【3’4】称 体内槲皮素和白藜芦醇能与红细胞的细胞膜结合，进而与血红蛋白结合， 这些结合型药物是具有生物活性的【5】，它们在体内能有效地避免一些酶类 物质对其干扰，另外，结合型药物延长了药物经过代谢和排泄的消除时间， 延长了药物在体内存在时间。本论文研究m与黄酮类小分子的相互作用， 对于在分子水平探讨药物的药效、作用机理等内容具有重要意义，是体内 药代动力学研究的必要补充。 目的：研究黄酮类小分子与m相互作用的光谱特征以及变化，讨论 二者间相互作用的猝灭机制、结合常数和结合位点数、非辐射能量转移距 离、相关热力学参数，以及Hb产生构象变化的光谱信息，并考察体内常 C对二者相互作用的影响。 见金属离子Fe2+和日常营养物质Vitamin 方法：在模拟人体生理pH值环境下，结合采用紫外．可见光谱法和 荧光光谱法，分别在室温(298K)及正常生理温度(310K)的两种温度 条件下研究八种黄酮小分子(野黄芩苷、黄芩苷、木犀草素、金丝桃苷、 木犀草苷、芹菜素、金合欢素、金合欢苷)与牛血红蛋白(BHb)的相互 作用；讨论其相互作用的猝灭机制，通过计算得出结合常数和结合位点数； 通过叠加图谱积分面积求非辐射能量转移距离；利用热力学方程式判断作 用力类型；采用同步荧光分析法和三维荧光技术探讨BHb构象的变化情 况；在298K条件下，测定Fe2+和VitaminC对该结合反应结合常数的影 中文摘要 响以及BHb构象变化。 结果：黄芩苷、木犀草素、木犀草苷、芹菜素、金合欢素分别以动态 猝灭方式猝灭BHb自身产生的荧光，野黄芩苷、金丝桃苷、金合欢苷以 静态猝灭方式猝灭体系荧光。它们的结合常数大小顺序依次为：野黄芩苷、 黄芩苷、木犀草素、金丝桃苷、木犀草苷、芹菜素、金合欢素、金合欢苷， 1．81x105、7．01 BHb相互作用过程中都存在非辐射能量转移，且结合反应过程为自发进 行。黄芩苷、木犀草素、木犀草苷、芹菜素、金合欢素均以疏水作用力与 BHb发生相互作用，野黄芩苷、金丝桃苷以静电作用，金合欢苷以氢键 和范德华力作用于BHb。同步荧光分析和三维光谱表明，八种黄酮小分 子与BHb相互作用后，影响其原有光谱发生红移，自身蛋白质构象发生 变化。在Fe2+和VitaminC的影响下，八种黄酮小分子与BHb的相互作用 分别有不同程度变化。 结论：在模拟人体生理pH环境下，298K及310K温度下，八种黄酮 类小分子与BHb发生了相互作用，改变了药物原来的存在状态以及在体 内的分布状况，BHb原有蛋白质构象发生了变化。Fe2+和VitaminC在反 应体系中的存在，会使原结合反应产生不同程度变化。 关键词：血红蛋白；黄酮小分子；荧光光谱法；紫外．可见光谱法； 相互作用。 2 英文摘要 ————————————————————————————————————————————————一 一 Studiesonthe interaction between flavonoidsand and eight hemogl