RANTES和SPARC基因在角膜移植排斥反应中的表达.pdfVIP

中国协和医科大学博士研究生论文搿要 摘 要 目的：动态检测细胞趋化因子，激活正常T细胞表达和分泌的调节物 应中的表达，为角膜移植排斥反应的早期诊断提供依据。 f方法：首先建立实验大鼠异体角膜移植动物模型，并设同体角膜移植、 角膜碱烧伤模型为对照组，在不同时间段提取各组角膜上皮细胞总RNA。 经琼脂糖凝胶电泳后，采用激光密度扫描半定量RANTEs和sPARC mRNA的表达水平。然后对PCR扩增结果中主要条带用限制性内切酶酶 切分析，验证表达结果。在取角膜上皮之前，对受试动物进行裂隙灯、活 体共聚焦显微镜检查，最后角膜病理，来判断角膜排斥与否和程度。 因的低表达；2．异体角膜移植3天后各时间点均见排斥眼RANTEs基因 的高表达，同体角膜移植及角膜碱烧伤后未见表达；3．SPARc在角膜移 植及碱烧伤后均见较高水平表达，且与正常细胞表达有显著差异。4．在 排斥反应大鼠角膜，RT—PcR所检测基因表达结果与活体共聚焦显微镜 观察及角膜病理结果呈同步趋势；5．用RT．PCR方法检测基因变化诊断 排斥反应早于裂隙灯或共聚焦显微镜检查。序 结论：大鼠角膜上皮RANTESInRNA表达上调与角膜移植排斥反应 特异性相关。同时，SPARC在角膜移植排斥反应、角膜碱烧伤和角膜创 达早于裂隙灯观察到的移植排斥反应一周。由此，选择性对细胞因子 mRNA扩增，是早期诊断角膜移植排斥反应的有效方法。 关键词： 角膜移植 排斥反应 基因表达 逆转录．聚合酶链反应RANTESSPARC 中国协和医科大学博士研究生论文搿要 Abstract the and evaluate chemokines，RANTES Purpose：Tb SPARC，gene to whetherthereis aftercomea anddetermine exDression transplantation betweenchemokine and relation temporal expressionallograftrejection．This for ofcomea newmethods proiectmayexplore earlydiagnoses transplant reJectlon． modelofcomea andcomeal 】Ⅵethods： rat First，The transDlantation and serVed alkali wereestablished． normal nonsurgical iniury Isografts eyes both ascontrol RATENSandSPARC specinlents．Secondly，