臭氧对兔膝关节骨性关节炎作用的实验的研究.pdf

中文摘要 ireOS tiS teoarthri 退行性骨关节炎(degenerat 0A)病因尚未完全 明了，目前认为是多因素致病，临床上采用医用臭氧(O，)关节腔内注射 治疗早～中期OA取得了较好的疗效，但0，的作用效应及其治疗机理目前 仍不甚明了，本实验采用Hulth模型造模后，在兔膝关节腔内注射臭氧 (0，)，探讨O。抑制软骨细胞退变作用效应及机理，为医用O，治疗早一中 期OA提供实验支持。 一、03对关节软骨的病理改变的影响 32 目的：观察O，对Hulth模型OA软骨光镜下改变的影响。方法： 只兔随机分为2组，分别为治疗组16只，模型组16只，采用Hulth模型， 白手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日一次，连续3天；治疗 注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：2ml，连 续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入空气处死实验兔，将实验兔 的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔，行大体观察，锐利刀片切 取左股骨内髁软骨，将软骨标本置于10％甲醛中固定，经一系列脱水、 10％EDTA脱钙处理，共10天；软骨组织石蜡包埋；腿染色，生物显微镜 观察。结果：0，实验组软骨表面细胞变性、排列紊乱、可见软骨细胞坏 死、脱落，少量的炎性渗出物，软骨表面可见糜烂斑，成纤维细胞和毛细 血管增生相对少见；0A对照组软骨表面细胞排列紊乱、坏死、变性较实 验组明显，可见明显的溃疡，达深层软骨，可见明显的炎性细胞渗出及成 纤维细胞和新生的毛细血管增生，可见纤维组织增生于溃疡底部及溃疡底 部的软骨细胞变性。结论：03试验组关节软骨退变的程度较OA对照组减 轻，软骨缺损也较轻，表明40mg／LO：一O，的混合气体能有效延缓兔膝关 节骨关节炎的软骨退变的病理进程。 目的：观察0，对Bul 32 th模型OA软骨电镜下改变的影响。方法： 只兔随机分为2组，分别为治疗组16只，模型组16只，采用Hulth模型， 自手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日一次，连续3天；治疗 组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射40rag／L0：一0，混合气体2ml，连续 注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔内注射40mg／L0：2ml，连 续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入空气处死实验兔，将实验兔 的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔，行大体观察，锐利刀片切 取左侧股骨内髁关节软骨修剪成1×1×2mm的小条；3％戊二醛酸固定24 小时；O．1M磷酸缓冲液冲洗3次；0．1％四氧化锇固定90min；去离子水冲 洗3次；不同浓度丙酮逐级脱水；脱钙液脱钙后以61G环氧树脂浸透、包 埋、硬化后修块，半薄切片；定位后切0．05ram超薄切片，电子染色后电 镜观察。结果：OA对照组大部分的软骨细胞明显肿胀且形态不规则，细 胞周晕消失，粗面内质网明显扩张，微绒毛断裂且变短，粗面内质网网膜 溶解断裂，胞浆内可见脂滴存在；细胞核形态不规则，细胞核严重变形、 凹陷，出现腔隙陷窝及囊泡形成等改变；0，实验组软骨细胞大部分均正 常，细胞为椭圆形或梭形，细胞核完整，可见细胞核内异染质轻度边集， 线粒体散在分布于胞浆内，粗面内质网较对照组丰富，表面可见许多微小 突起。结论：03试验组的关节软骨细胞退变的程度较oA对照组减轻，软 骨缺损也较轻，表明0，能有效延缓关节软骨退变的病理进程。 二、03对软骨细胞中IL-1B表达的影响 将36只兔随机分为3组，分别为治疗组16只，模型组16只，正常组4 只，采用Hulth模型，自手术当日起肌注普鲁卡因青霉素40万u，每日 一次，连续3天；治疗组每日向治疗组兔左膝关节腔内注射40rag／L0： 一0，混合气体2ml，连续注射7天；对照组每日向对照组兔左膝关节腔 内注射40rag／L0：2ml，连续注射7天；连续注射7天后，耳缘静脉注入 空气处死实验兔，将实验兔的左膝关节备皮，碘伏消毒，切开左膝关节腔， 耳缘静脉注入空气