YY1基因对水牛植入前胚胎DNA甲基化影响的初步研究.pdf

．11 I (93．64％)的抑制效果显著高于shRNAl(53．77％)。 3．YYl基因过表达对水牛胚胎发育及DNA甲基化的影响。采用线性化 处理的质粒，对体外受精8-10h后的水牛受精卵进行卵胞质注射。分析质 粒注射浓度、不同外源DNA质粒对水牛胚胎发育及外源基因表达状况的影 DNMTl基因表达的影响。结果发现，受精卵胞质注射25 pg／mL 入前胚胎的表达模式呈相反的趋势，随着胚胎的发育，YYl基因的表达逐 渐增高，囊胚期达到最高，相反，DNMTl基因在桑葚胚前表达较高，囊胚 高水牛胚胎DNA甲基化水平。 结论：克隆得到的水牛YYl基因CDS全长序列在生物进化上具有高度 干扰序列均能有效抑制水牛YYl基因的表达；水牛植入前胚胎YYl和 DNMTl基因的表达量增高，提高胚胎DNA甲基化水平。 关键词：水牛YYl基因DNA甲基化RNA干扰DNMTl APRELD加[NARY STUDYONT胍EFFECTOFYY1 GENEON DNA M匝THYLATIONINBUFFALOPREIMPL AN彤汀ION EⅣ匝lRYOS ABSTRACT YY1 isa and conserved factor ubiquitouslyexpressed highly transcription that hasbeen ina of as implicatedvariety roles，both transcriptionalregulatory anactivatorandsilencerof understandthe geneexpression．To expression ofYYl inbuffalo itseffectonDNA paRem gene preimplantationembryos，and this ORF ofbuffaloYY1 methylationregulation，instudy,the sequences gene were shRNA were a cloned，the screened，and fragments eukaryoticexpression vectorofYYl Wasconstrcucted．Theeffectsof ofYY1 on over-expression buffalo and DNA werestudied． embryodevelopmentgenomicmethylation 1．ThebuffaloYYlCDS was fusion vectorof