化学发光共能量转移体系的研究及其在肿瘤标志物检测中的应用.pdfVIP

化学发光共振能量转移体系的研究及其在肿瘤标志物检测 中的应用 摘要 化学发光分析法因其灵敏度高、操作方便、设备简单、易于实现自动化等 优点，越来越受到科研工作者的广泛关注。本文对Lumin01．H202．辣根过氧化物 酶(HRP)．荧光素(F)化学发光共振能量转移体系的反应机理进行了研究， 基于该体系建立了适体生物传感器，实现了对凝血酶的高灵敏度检测。本文所 建立的方法具有高灵敏度、高选择性，在体外诊断、临床研究、药物筛选的研 究等方面具有广泛的应用前景。 本文主要开展了以下几个方面的工作： 一、Lumin01．H202．HRP-荧光素化学发光共振能量转移体系的研究 研究了荧光素对Lumin01．H202．HRP化学发光反应体系的增强作用。采 Luminol-H202。HRP．荧光素化学发光共振能量转移体系在游离状态和绑定状态 下的荧光光谱性质，并对其反应机理进行了研究。实验结果表明，在该化学发 光共振能量转移体系中，在H202的氧化和辣根过氧化物酶(HRP)的催化作 用下，luminol作为能量供体，将化学反应释放的能量转移给能量受体荧光素。 萁反应机理为：荧光素自由基(F．．)促进luminol自由基(L·’)的形成，其与 nnl处发光。 形成荧光素内过氧化物(F022’)。F022-释放出氧气的同时在510 二、基于化学发光共振能量转移体系检测凝血酶的研究 建立了一种基于适体生物传感器检测凝血酶的方法。将鲁米诺和荧光素(或 HRP)标记的凝血酶双适体与纳米金．磁珠复合物结合，以降低检测背景值，利 用适体与凝血酶的特异性结合作用将其从纳米金．磁珠复合物表面解离下来，采 用Lumin01．H202．HRP．荧光素化学发光共振能量转移体系，建立了适体生物传 感器，实现了对凝血酶的高灵敏度检测，检测限达1．0×10母mol／L，且具有良 好的选择性。 关键词：化学发光能量转移纳米探针适体凝血酶 H STUD正SONCHEM[ⅡI7M【NESCENCERESONANCE ENERGYTRANSFERSYSTEMANDITSAPPLICArl0N IN MARKERDETECTION TUMOR amoreandmore become popularanalytical Chemiluminescence(CL)has toits instrumentation，easy techniqueowinghighsensitivity,easyoperation，simple the automation．Tllisthesisstudied luminol—H202一horseradish peroxide resonance energy transfer(CRET)system． (HRP)-fluorescein(F)chemiluminescence BasedonthisCRET was a system，allaptamer-biosenserestablished，achievinghi班 detectionofthrombin．The inthis has